Krooninen sairaus

tiivistelmä

biotinidaasiprekursori tunnistettiin secretome analyysi kilpirauhassyövän solulinjoissa käyttäen proteomiikka. Tavoitteena nykyisen oli analysoida ilmaus biotinidaasiprekursori kilpirauhassyövän hoitoon kudosten ja ohut neula pyrkimys (FNA) näytteet arvioida sen ja ennustavia potentiaalia kilpirauhassyöpä. Immunohistokemiallinen analyysi biotinidaasiprekursori suoritettiin 129 papillaarinen kilpirauhassyöpä (PTC, 34 hyvänlaatuinen kilpirauhasen kudoksia ja 43 FNA näytteet ja korreloidaan potilaan ennusteeseen. Yleisesti biotinidaasiprekursori ilmentyminen aleni PTC verrattuna hyvänlaatuinen kyhmyjä (p = 0,001). Vertailu aggressiivista ja ei-aggressiivinen PTC osoitti vähenemisen yleisessä biotinidaasiprekursori ilmaisun entisessä (p = 0,001). menetys yleisen biotinidaasiprekursori ilmentyminen oli yhteydessä huonoon taudista vapaa eloonjääminen (p = 0,019, vaarat suhde (HR) = 3,1). Olemme tutkineet vaikutus of subsellulaariseen lokerointi ydin- ja sytoplasman biotinidaasiprekursori potilaiden eloonjäämiseen. Vähentynyt ydin- ilmentymistä biotinidaasiprekursori havaittiin PTC verrattuna hyvänlaatuinen kudoksiin (p 0,001). kun kerrostuneisuus sisällä PTC, ydin- ilmentyminen väheni aggressiivinen verrattuna ei-aggressiivinen kasvaimet (p 0,001). Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti merkittävää yhteyttä menetyksen ydinvoiman biotinidaasiprekursori ilmaisun pienemmällä taudista vapaa eloonjääminen (p = 0,014, HR = 5,4). Sytoplasmisen biotinidaasiprekursori ilmentyminen väheni aggressiivinen kilpirauhassyövän verrattuna ei-aggressiivinen kasvaimet (p = 0,002, Ristitulosuhde (OR) = 0,29), mikä oli ilmeistä sen merkittävää yhteyttä kehittyneitä T vaiheessa (p = 0,003, OR = 0,28), solmukohtien etäpesäkkeitä (p 0,001, OR = 0,16), kehittynyt TNM (p 0,001, OR = 0,21) ja ekstratyroidaalisen laajennus (p = 0,001, OR = 0,23). Kuitenkin monimuuttujamenetelmin ekstratyroidaalisen laajennus nousi merkittävin ennustetekijöiden merkkiaine aggressiivinen kilpirauhasen karsinoomat (p = 0,015, HR = 12,8). Johtopäätöksenä menetystä kokonaisuudessaan biotinidaasiprekursori ilme on uusi markkeri kilpirauhassyöpä aggressiivisuus.

Citation: So AK-C, Kaur J, Kak I, Assi J, MacMillan C, Ralhan R, et al. (2012) biotinidaasiprekursori on Novel Marker for papillaarinen kilpirauhassyövän Aggressiivisuus. PLoS ONE 7 (7): e40956. doi: 10,1371 /journal.pone.0040956

Editor: Kapil Mehta, University of Texas MD Anderson Cancer Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 26 maaliskuu 2012; Hyväksytty: 15 Kesäkuu 2012; Julkaistu: 23 heinäkuu 2012

Copyright: © 2012 Eli et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: taloudellinen tätä työtä tukeakseen Mount Sinai Foundation of Toronto, Da Vinci Gala Fundraiser, Alex ja Simona Shnaider professuurin kilpirauhassyöpä, The Temmy Latner /Dynacare Foundation, ja Mount Sinai Hospital Sisätautien Research Fund kiittävät. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Kilpirauhasen syöpä on yleisin pahanlaatuinen hormonitoimintaa kasvain ja osuus 90% syöpien umpirauhasissa joiden arvioitu vuosittainen ilmaantuvuus 122803 tapauksista maailmanlaajuisesti [1]. Useimmat kilpirauhassyövän on erinomainen ennuste; sekä papillaarinen ja follikulaarinen kilpirauhasen syövät ovat noin 85%: sta 90%: paranemisasteet, jos havaitaan varhaisessa vaiheessa ja hoitaa asianmukaisesti. Kuitenkin pieni osa on itse asiassa aggressiivinen ja voi kehittyä kaukainen etäpesäke johtaa korkeampiin kuolleisuutta [2]. Ottaen huomioon nopeampaa lisääntymistä kilpirauhassyövän kuin mikä tahansa muu kiinteä kasvain (noin 3 per 100000 ihmistä vuodessa), anaplastinen kilpirauhassyöpä ja muita aggressiivisia variantit muodostavat suuren haasteen onkologit [3]. Anaplastic kilpirauhassyöpä osuus on alle 2% kaikista kilpirauhassyövän, mutta se aiheuttaa jopa 50% kuolemista tästä pahanlaatuisen vuosittain; 90% anaplastinen kilpirauhassyöpä potilaista kuolee 6 kuukauden kuluessa diagnoosista (mediaani eloonjäämisaste on 4 kuukautta) [3], [4]. Anaplastinen kilpirauhassyöpä ja aggressiivinen variantit papillaarisen kilpirauhassyöpä, follikulaarinen ja metastaattisen kilpirauhassyövän on suuri riski toistumista, lyhentää taudista vapaan ajan ja kuolemaan 5-10 vuotta [3]. Lisäksi anaplastinen kilpirauhassyöpä on erittäin vastustuskykyinen tavanomaisten syövän hoidossa. Niinpä anaplastinen kilpirauhassyöpä ja aggressiivinen variantit ovat lähde huomattavaa sairastuvuutta ja kuolleisuutta aiheuttava sairaus muuten ylpeilee erinomainen ennuste. Avain kaventaa kuilua ennusteen aggressiivisten ja ei-aggressiivinen variantteja on havaita yllyttäminen tekijä (t), jotka ovat vastuussa aggressiivista käyttäytymistä. Tällä hetkellä on puutetta molekyylimarkkereiden ennustaa aggressiivisuus kilpirauhassyövän.

Tällä hetkellä hienoksi neula toive (STT) on yleisimmin käytetty ennen leikkausta tekniikka diagnoosin kilpirauhasen kyhmyt 1 cm kokoisia. Kuitenkin jopa käytön ultraääni-ohjattu STT usein vaivaama tuloksettomia koepalan tuloksia (10-20% kaikista tapauksista) [5]. Nämä potilaat myöhemmin suoritetaan kilpirauhanen, invasiivisen toimenpiteen, joka on usein tarpeetonta, koska suurin osa epäillyn vauriot ovat hyvänlaatuisia ( 80%) [6]. Lisäksi toistuvat tapaukset lisähoitoa muodossa leikkauksen tai radioaktiivisen jodin ablaatiota että edelleen vaarantavat niiden elämänlaatua. Aika on kypsä varhaiseen tunnistamiseen aggressiivinen tapauksista kautta biomarkkereiden (t) havaitseminen ja luokittelu korkean riskin potilailla. Näin ollen on kiireellinen tarve tunnistaa biomarkkereita, joita voidaan käyttää lisänä FNA erottaa hyvänlaatuinen kilpirauhasen kyhmyt pahanlaatuisia kasvaimia (erityisesti tarkempi diagnoosi määrittelemätön tapauksista) ja tukea syrjintää aggressiivisen kilpirauhassyövän niiden ei-aggressiivinen kollegansa leikkauksen jälkeinen määritellä paremmin potilaan hoidossa.

etsiessään uusia syövän biomarkkereita tälle maligniteetin, olemme analysoineet secretome alkaen kilpirauhassyövän solulinjoista tunnistaa syöpään asiaankuuluvat erittyviä proteiineja, jotka voivat toimia mahdollisina biomarkkereita [7] . Yksi ehdokas tunnistettujen proteiinien tutkimuksessamme oli biotinidaasiprekursori, entsyymi, joka katalysoi hydrolyysin biosytiinin, tuote biotiini-riippuvaisten karboksylaasi hajoamista, biotiiniin ja lysiini. Biotiini puute voi johtaa vähentynyt aktiivisuus holocarboxylase syntetaasin, entsyymiä, joka välittää sitoutumisen biotiini histonien [8], joka on olennainen osa epigeneettiset tapahtumat, jotka säätelevät chromatin rakenteet ja geenien toiminnan. Alhainen biotinidaasiprekursori havaittiin aggressiivinen anaplastisen solulinjaa (CAL-62) verrattuna ei-aggressiivinen papillaarinen peräisin kilpirauhassyöpä solulinja (TPC-1). Kliinistä merkitystä ehdotti osoittamalla kevyemmästä biotinidaasiprekursori aggressiiviseen kilpirauhassyöpä potilaiden seerumit verrattuna ei-aggressiivinen ja hyvänlaatuisia seerumit western blotting [7]. Nykyisessä tutkimuksessa, tärkein tavoite oli määrittää kliinistä merkitystä biotinidaasiprekursori markkerina erottamaan hyvän- kilpirauhasen ja pahanlaatuisia kasvaimia sekä ositusta aggressiivinen ja ei-aggressiivinen PTC joka voisi toimia mahdollisena välineenä hoidon parantaminen tämän pahanlaatuisen .

Materiaalit ja menetelmät

kliinis ominaisuudet Potilaiden ja kudosnäytteiden

Tutkimus hyväksyi tutkimuseettiseltä Mount Sinai Hospital, Toronto, Ontario, Canada. Arkistoitu formaliinikiinnitetyt parafinoidut kudosta korttelin päässä Mount Sinai Hospital Kasvaimen Bank haettiin, tarkistaa patologi (CM), ja leikkaa antaa 5 pm paksun osiot immunohistokemiallisella värjäyksellä. Diagnoosit olivat peräisin histopatologisia analyysejä ja kliininen tutkimus. Hyvänlaatuinen tapauksissa mukana monikyhmyinen struuma, hyperplastic kyhmyjä, ja follikulaarinen adenoomia, kun taas kaikkien muiden kuin aggressiivinen ja aggressiivinen kasvaimet tutkittiin tässä olivat hyvin eriytetty papillaarinen kilpirauhasen karsinoomat joka sisälsi seuraavat vaihtoehdot: klassinen, follikulaarinen oncocytic, hajanainen sklerosoiva, ja pitkä solu. Piirteistä kasvaimen aggressiivisuus oli TNM IV luokittelua, etäpesäkkeiden, hermoa invaasio, ja tauti uusiutuu tai pysyvyys. Muita harkittiin seuraavia mahdollisia riskitekijöitä aggressiivisuus lukien: TNM III, verisuonten invaasio, ekstratyroidaalisen laajennus, imusolmuke etäpesäke, ja ei-klassisen papillaarinen kilpirauhassyövän varianttitaudista (erityisesti läsnäolo kolme tai useampi näistä tekijöistä tutkituissa tapauksissa).

näiden kriteerien perusteella, 163 kudosnäytteet tutkittiin tässä tutkimuksessa luokiteltiin 34 hyvänlaatuinen (mediaani-ikä 51 vuotta, alue: 16-76 vuotta), 81 ei-aggressiivinen (mediaani-ikä 44 vuotta, alue: 23-71 vuotta), ja 48 aggressiivisia (mediaani-ikä 52 vuotta, alue: 21-86 vuotta) kasvaimia.

Formaliinifiksoidusta parafinoidut solu korttelin päässä hienoksi neula toive valmisteet 43 potilasta samalla saatu Mount Sinai Hospital Kasvain Bank ja kukin näyte diagnoosi vahvistettiin histologinen tutkimus vastaavien kilpirauhanen näyte (CM). Niinpä FNA näytteet luokiteltiin 23 hyvänlaatuinen, 13 ei-aggressiivinen, ja 7 aggressiivinen tapauksista.

Potilas seurata tietoja haettiin kliinisen tietokannasta korreloida proteiinin ilmentyminen kasvaimissa kliinisten tutkimusten tulosten arviointia n prognostisen merkitystä biotinidaasiprekursori. Potilaita seurattiin enintään 19,5 vuotta.

immunohistokemiallinen analyysi biotinidaasiprekursori ilmentäminen Kilpirauhasen Karsinoomat ja FNA näytteet

diat immunovärjättiin kuten aiemmin on kuvattu [9], käyttäen α-biotinidaasiprekursori K-17 kanin polyklonaalista vasta-ainetta (Santa Cruz Biotechnology, 1:100 laimennus) peptidiä vastaan ​​nousseen kartoitus sisäiseen alueeseen ihmisen biotinidaasiprekursori. Antigeeni haku suoritettiin Tris-EDTA-puskuriin (10 mM Tris-emästä ja 1 mM EDTA: ta, jossa oli 0,05% Tween 20, pH 9,0), mikroaalloilla 20 minuutin ajan. Negatiivisen kontrollin kudosleikkeiden, ensisijainen vasta-aine korvattiin isotyyppispesifisessä ei-immuuni-hiiri-IgG. Leikkeet arvioitiin valo mikroskooppinen tutkimus. Kuvat otettiin käyttäen Visiopharm Integrator System (Horsholm, Tanska).

arviointi immunohistokemiallinen värjäys

immunopositiivista värjäytyminen arvioitiin viidellä alueilla kudosleikkeiden kuvatulla [9]. Osiot pisteytettiin positiivisiksi jos epiteelisolut osoittivat immunopositivity sytoplasmassa ja /tai tumassa, kun havaitaan kaksi arvioijaa, jotka oli sokaissut kliiniseen tulokseen. Jaksoissa pisteytettiin seuraavasti: 0, 10% soluista; 1, 10-30% solut; 2, 30-50% solut; 3, 50-70% solut; ja 4, 70% soluista osoitti immunoreaktiivisuus. Leikkeitä myös saivat puolittain määrällisesti perusteella intensiteetti seuraavasti: 0, ei mitään; 1, lievä; 2, kohtalainen; ja 3, voimakas. Lopuksi, yhteensä pisteet (välillä 0 7) saatiin lisäämällä tulokset prosenttiosuuden positiivisuus ja voimakkuus kunkin hyvänlaatuinen kilpirauhasen ja pahanlaatuinen kasvain kudosleikkeiden. Immuunihistokemialliset tiedot tehtiin tilastollinen analyysi.

seurantatutkimus

Niistä 129 kilpirauhassyöpä tapauksissa seuranta oli saatavilla 116 (90%) potilaista, kun taas 13 potilasta ( 10%) menetettiin seurata. Kilpirauhassyöpä potilasta seurattiin enintään 19,5 vuotta (vaihteluväli 2-234 kuukautta; keskiarvo 43 kuukautta ja mediaani 29 kuukautta). Uusiutuminen tai ilman etäpesäkkeitä havaittiin 19 116 (16,4%) potilaista seurataan seurannan. Yhdeksänkymmentä seitsemän potilasta, jotka eivät näytä toistumisen olivat elossa loppuun seurannan aikana. Tautivapaa eloonjääminen ilmaistiin määrä kuukautta leikkauksen uusiutumiseen tai kunnes viimeinen mahdollinen seurata tapauksessa potilailla, jotka ovat taudista vapaa.

Parafiini upotettujen leikkeiden hyvänlaatuisen kilpirauhasen kyhmyt ja pahanlaatuisia kasvaimia värjättiin käyttäen anti-biotinidaasiprekursori polyklonaalinen vasta-aine, kuten on kuvattu menetelmät-osassa: a) Hyvänlaatuinen kudoksen leikkaus, joka esittää ydin- ja yleisen biotinidaasiprekursori immunovärjäys; b) papillaarinen ei-aggressiivinen kilpirauhassyöpä leikattuna, joka kuvaa väheneminen tumavärjäystä ja kasvua sytoplasman biotinidaasiprekursori Immunovärjäyksen kasvainsoluissa; c) papillaarinen aggressiivinen kilpirauhassyöpä leikkaus, joka esittää pienentää yleistä (ydin- ja sytoplasman) biotinidaasiprekursori immunovärjäyksellä; d) kilpirauhassyöpä osassa käytettiin negatiivisena kontrolli, joka osoittaa ei immunoreaktiivisuus soluissa (a-d, alkuperäinen suurennos x 400).

Tilastollinen analyysi

Immuunihistokemialliset tiedot alistettiin tilastollinen analyysi SPSS 17.0 ohjelmistolla (SPSS Inc., Chicago, IL). Sirontakaavioissa käytettiin määrittämään jakeluun sytoplasmisen, ydin- ja yleinen biotinidaasiprekursori ilmaisun hyvänlaatuinen, ei-aggressiivinen ja aggressiivinen kilpirauhassyövän. Herkkyys ja spesifisyys laskettiin ja kvantitoitiin käyttäen vastaanotin toimii (ROC) analyysi. Perustuen optimaalinen herkkyys ja spesifisyys ovat osoituksena ROC analyysi, cut-off oli luotu biotinidaasiprekursori proteiinin ilmentymisen. Yleisestä biotinidaasiprekursori ilme, cut-off-arvo ≥3.6 määriteltiin positiivinen immunoreaktiivisuus tilastollista analyysia. Cut-off-arvo ≥2 ja ≥4 määriteltiin positiivinen kriteeri yksittäisten ydin- ja sytoplasman biotinidaasiprekursori immunopositivity vastaavasti yksityiskohtaista tilastollista tutkimusta. Väliset suhteet biotinidaasiprekursori ilmaisun ja kliinis parametrit testattiin käyttämällä Chi-Square ja Fischerin tarkka testi. Kaksipuolinen p-arvot laskettiin ja p 0,05 pidettiin merkittävänä. Prognostic merkitys kaiken ydin- ja sytoplasmista biotinidaasiprekursori ilmentyminen arvioitiin Kaplan-Meier selviytymisen ja Coxin monimuuttuja-verrannollinen vaarat regressioanalyysiä.

sirontakaavioissa osoittaa jakautuminen koko Immunovärjäyksen tulokset määräytyy IHC kudosleikkeiden hyvänlaatuisia (n = 34), ei-aggressiivinen (n = 81) ja aggressiivinen (n = 48) kilpirauhassyöpä kudoksiin. Pystyakseli saadaan vain immunohistokemiallinen pisteet kuvatulla tavalla Methods. a) Vähentynyt ydin- kertymistä biotinidaasiprekursori havaittiin aggressiivista ja ei-aggressiivinen kilpirauhassyövän analysoitu. Sirontakuvaajaan osoittaa väheneminen ydinvoiman biotinidaasiprekursori immunovärjäämällä kasvava kasvain aggressiivisuus; b) Lisääntynyt sytoplasminen kertymistä biotinidaasiprekursori havaittiin kilpirauhasen syöpä analysoitiin väheneminen ilmaisun aggressiivinen verrattuna ei-aggressiivinen PTC; c) Sirontakuvaajan oli vähentynyt yleistä biotinidaasiprekursori immuunivärjäysmenetelmällä yhä kasvaimen aggressiivisuus.

pystyakseli kunkin käyrä herkkyyttä ja vaaka-akseli osoittaa 1-spesifisyys. Herkkyys, spesifisyys, ja AUC-arvot esitetään yhteenveto taulukoissa 2a ja 2b.

Tulokset

immunohistokemiallinen analyysi biotinidaasiprekursori ilmentäminen Kilpirauhasen kudokset

Niistä 34 hyvänlaatuinen kudokset analysoitiin 33 kudokset (97,1%) osoitti kaiken kaikkiaan sekä ydin- kertymistä biotinidaasiprekursori proteiinia (taulukko 1, kuva 1a). Sytoplasminen ilmentyminen biotinidaasiprekursori havaittiin 9 (26,5%) hyvänlaatuinen kudoksissa (taulukko 1). Niistä pahanlaatuinen kilpirauhasen kudoksia, 39/129 (30,2%) osoitti menetystä kokonaisuudessaan (sekä tumassa ja sytoplasmassa) biotinidaasiprekursori ilme. Kun kerrostuminen osaksi ydin- ja sytoplasman subcellular osastoja, 84/129 tapauksessa (65,1%) osoitti menetys ydin- biotinidaasiprekursori ja 87/129 (67,4%) kohonneen sytoplasmista ilmentymistä kasvainsoluissa (taulukko 1, kuva 1b). Erityisesti menetystä kokonaisuudessaan sekä ydin- biotinidaasiprekursori ja nousu sytoplasman biotinidaasiprekursori ilmaus oli merkittävä pahanlaatuisia kasvaimia verrattuna hyvänlaatuisia kyhmyjä (p = 0,001, p 0,001, p 0,001 vastaavasti taulukko 1). Vuonna aggressiivinen kilpirauhassyöpä, oli merkittävästi pienentyneet biotinidaasiprekursori lauseke (p = 0,001) sekä ydin- (p 0,001) ja sytoplasman (p = 0,002) tasoja verrattuna ei-aggressiivinen kilpirauhasen kasvaimet (taulukko 1, kuviot 1 c ja 2 ). Ei immunovärjäys havaittu kudosleikkeiden käytettiin negatiivisina kontrolleina, jossa primaarinen vasta-aine oli korvattu isotyypin IgG-(kuvio 1 d).

FNA yksilöt hyvänlaatuinen (paneeli a), ei-aggressiivista papillaarinen kilpirauhassyövän (paneeli b ), ja aggressiivinen papillaarinen kilpirauhassyövän (paneeli c) tapaukset immunovärjättiin 1:100 α-biotinidaasiprekursori K-17 kanin polyklonaalista vasta-ainetta. FNA näyte käytettiin negatiivisena kontrollina ei osoita immunoreaktiivisuus soluissa (paneeli d). Valomikroskooppikuvat osoittavat lausutaan lasku ydinaseiden biotinidaasiprekursori ilmaisun aggressiivisempia kilpirauhassyöpä tapauksissa ja esitellään 400 × alkuperäinen suurennos.

Alennettu Kaiken biotinidaasiprekursori Expression korreloivat kasvaimen aggressiivisuus

väheneminen yleinen biotinidaasiprekursori ilme korreloi merkitsevästi kehittynyt T vaiheessa (p = 0,001, OR = 4,29), solmukohtien etäpesäkkeitä (p 0,001, OR = 6,96), vaihe III + IV kasvaimet (p = 0,001, OR = 4,65), ja ekstratyroidaalisen laajennus ( p 0,001, OR = 5,27). Lisäksi menetys soluliman ja ydinvoiman biotinidaasiprekursori yksilöllisesti osoitti myös merkittävää yhteyttä kehittyneitä T vaiheessa (p = 0,003, p 0,001 vastaavasti), solmukohtien etäpesäkkeitä (p 0,001, p 0,001 vastaavasti), vaihe III + IV kasvaimet (p 0,001 , p = 0,002 vastaavasti), ja ekstratyroidaalisen laajennus (p = 0,001, p = 0,003 vastaavasti, taulukko 1). Nämä havainnot viittaavat siihen, että menetys biotinidaasiprekursori sekä sytoplasman (p = 0,002, taulukko 1) ja ydinvoiman (p 0,001, taulukko 1) taso liittyy aggressiivinen fenotyyppiä kilpirauhassyöpä. Yhdistys väheneminen ydin- ja sytoplasman biotinidaasiprekursori näiden kliinisten parametrien tarjoaa lisää uskottavuutta menetystä kokonaisuudessaan biotinidaasiprekursori korreloivat merkitsevästi kasvaimen aggressiivisuus (p = 0,001, taulukko 1).

Tauti elinaika käyriä biotinidaasiprekursori ilmentyminen (a) ydin [mediaani taudista vapaan eloonjäämisen 116 kuukautta]; (B) solulimassa [mediaani taudista vapaan eloonjäämisen 111 kuukautta]; (C) ja yleinen (tuma ja solulima) [mediaani taudista vapaan eloonjäämisen 109 kuukautta]. Taudista vapaan elinajan käyriä (d) ekstratyroidaalisen laajennus [mediaani tautivapaan elinajan 36 kuukautta], ja (e) imusolmukestatuksesta [mediaani tautivapaan elinajan 54 kuukautta].

potentiaali biotinidaasiprekursori biomarkkerina varten kilpirauhassyöpä

Receiver operating ominaiskäyrä analyysiä käytettiin määrittämään potentiaalin biotinidaasiprekursori ilmaisun biomarkkerina erottamaan hyvän- kyhmyjä ja pahanlaatuiset kasvaimet (taulukko 2). Menetystä kokonaisuudessaan ja ydinvoiman sekä lisääntynyt soluliman ilmentyminen biotinidaasiprekursori erottaa hyvänlaatuisen kudosten pahanlaatuisia kasvaimia AUC-arvot 0,816, 0,972 ja 0,662 vastaavasti (kuvio 3, taulukko 2). Kun kerrostuminen syövän osaksi aggressiivinen ja ei-aggressiivinen kasvaimia, vähentää yleistä, ydin- ja sytoplasmista ekspressiota biotinidaasiprekursori havaittiin aggressiivinen kilpirauhassyövän kanssa AUC-arvot 0,715, 0,696 ja 0,347 vastaavasti. (Kuvio 3, taulukko 2).

Detection of biotinidaasiprekursori Expression in Fine Needle Aspiraatit kilpirauhassyövän Potilaat Näytteitä

Analysoimme ilmentymisen biotinidaasiprekursori 23 hyvän- ja 20 pahanlaatuiset kilpirauhasen FNA näytteet (kuva 4). Samansuuntainen ilmaisun havaittiin STT osioita havaittu kirurgisesti resektoitiin kilpirauhasen kudosnäytteitä. Merkittävästi pienentyneet biotinidaasiprekursori ilmentyminen havaittiin kun verrataan hyvänlaatuinen FNA kohdat (23/23, 100%) ja pahanlaatuinen osiin (13/20, 65%) (p = 0,002). Kaikki hyvänlaatuiset FNA kohdat osoittivat ydin- ilmentymistä (23/23, 100%) biotinidaasiprekursori proteiinin verrattuna kilpirauhassyöpä osiin (13/20, 65%; p = 0,002). Soluliman ilmentyminen biotinidaasiprekursori havaittiin 6/23 (26,1%) hyvänlaatuiset tapauksista verrattuna 2/20 (10%) kilpirauhassyövän hoitoon tapauksissa (p = 0,25, OR = 0,315, 95% CI = 0,056-1,78). Kun vertailu aggressiivisia ja ei-aggressiivinen kilpirauhassyövän, yleinen biotinidaasiprekursori ilmaisun vähensi entisessä (5/7, 71,4%) verrattuna jälkimmäisen (2/13, 15,4%, p = 0.022). Lisäksi vähensi merkitsevästi ydin- ilmentymistä havaittiin aggressiivista (5/7, 71,4%) kilpirauhassyöpä tapauksissa verrattuna ei-aggressiivinen tapauksista (2/13, 15,4%, p = 0.022, OR = 0,073, 95% CI = 0.008- 0,674). Samalla vähennetään sytoplasmista ekspressiota biotinidaasiprekursori havaittiin aggressiivista (7/7, 100%) kilpirauhassyöpä tapauksissa verrattuna ei-aggressiivinen tapauksista (11/13, 84,6%, p = 0,521).

Kaiken biotinidaasiprekursori Loss kuin Predictor taudin etenemisen ja prognoosi

seurantatiedot 116 kilpirauhassyöpä potilaiden jopa 19,5 vuotta arviointiin käytettiin ennustetekijöiden merkitystä biotinidaasiprekursori ennustamiseen uusiutumisen näillä potilailla päätyttyä ensisijaisen hoitoon. Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti vähentää merkittävästi taudin elinaika potilailla, joilla on vähentynyt ilmentyminen biotinidaasiprekursori nucleus (p = 0,014, HR = 5,4, 95% CI = 1,2-24,1; mediaanielinajassa 116 kuukautta, kuva 5a), solulimassa (p = 0,022, HR = 2,8, 95% CI = 1,1-7,2; mediaanielinajassa 111 kuukautta, kuva 5b) ja yleinen (p = 0,019, HR = 3,1, 95% CI = 1,2-7,8; mediaanielinajassa 109 kuukautta, kuvio 5c). Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti vähentää merkittävästi taudin elinaika potilailla, joilla ekstratyroidaalisen laajennus (p 0,001, HR = 9,0, 95% CI = 3,1-26,4); eloonjäämismediaani 36 kuukauden kuva 5d), ja imusolmukestatuksesta (p 0,001, HR = 12,2, 95% CI = 2,8-53,8; mediaanielinajassa 54 kuukautta, kuvio 5e). Coxin regressioanalyysi (monimuuttuja) suoritettiin määrittämään ennustetekijöiden potentiaali ydin- ja sytoplasman biotinidaasiprekursori, erikseen ja yhdessä, kilpirauhasen syöpäpotilailla verrattuna iän, sukupuolen, t-lavastus, imusolmukestatuksesta, yleinen vaiheessa histologia tyyppi, histologia lajittelemaan ja ekstratyroidaalisen laajennus (taulukko 3). Ekstratyroidaalisen laajennus ja imusolmukestatuksesta noussut merkittävämpi kuin biotinidaasiprekursori markkereina huonoon ennusteeseen (p = 0,015, HR = 4,1, 95% CI = 1,3-12,8, ja p = 0,035, HR = 5,6, 95% CI = 1,1-27,8 vastaavasti) .

keskustelu

on täyttämätön tarve tunnistaa uusia biomarkkereiden (t), joka ei voi vain auttaa erottamaan hyvänlaatuista kilpirauhasen pahanlaatuisia kasvaimia, mutta myös kyky erotella aggressiivisia ja ei-aggressiivinen kilpirauhassyövän. Havainnot Tutkimuksemme osoittavat, että biotinidaasiprekursori täyttää molemmat kriteerit. Lisäksi meidän tutkimus osoittaa biotinidaasiprekursori tasot laskivat aggressiivinen kilpirauhasen karsinoomat ja ehdottaa sen mahdollisuuksia toimia markkerina kasvaimen aggressiivisuus. Tämä uusi käyttö biotinidaasiprekursori korostaa sen mahdollisuuksia toimia välineenä tunnistaa aggressiivinen kilpirauhassyövän alkuvaiheessa tarkemmiksi hoitoa. Äskettäin Kang

et al

[10] havaittu alensi biotinidaasiprekursori plasmassa rintasyövän potilaiden proteomianalyysi ja ehdotti biotinidaasiprekursori mahdollisena serologisen biomarkkereiden diagnosoimiseksi rintasyövän. Toisessa tutkimuksessa, Huang

et ai

[11] tunnistettiin geeniekspressioprofiili koostuu 11 geenien, jotka voisivat ennustaa lantion imusolmukkeiden etäpesäkkeiden kohdunkaulan karsinooma käyttäen oligonukleotidia microarray. Kiehtovan, yksi geenien levyteollisuutensa oli biotinidaasiprekursori, säädeltiin lantion imusolmuke etäpesäke, muistuttaa meidän havainnot kilpirauhassyöpä. Nämä tutkimukset tukevat havainnot, että biotinidaasiprekursori on vähentynyt merkittävästi aggressiivinen kilpirauhassyöpä. Vahvistavaa näyttöä aggressiivisia fenotyyppejä syöpiä muuta kuin kilpirauhasen edelleen eludes mahdollisen roolin, joka biotinidaasiprekursori voisi olla yleinen toimintatapa syövän aggressiivisuus.

STT on keskeinen väline hallinnoinnin kilpirauhasen kyhmyt ja FNA kaikkien kilpirauhasen kyhmyt 1 cm on suositellut [12], [13]. FNA tarjoaa turvallisempi vaihtoehto kilpirauhanen diagnostisena välineenä, koska vain 5% kilpirauhasen kyhmyt ovat pahanlaatuisia [14]. Expression of yleinen ja ydinvoiman biotinidaasiprekursori hyvänlaatuisia FNA näytteet ja sen menetys pahanlaatuinen tapauksissa erityisesti aggressiivinen kilpirauhassyövän, vastaa kuviota havaittu kilpirauhassyöpä kudoksissa. Täten biotinidaasiprekursori voi olla käyttökelpoinen mahdollisena diagnostinen markkeri FNA näytteiden tuloksettomia diagnoosi ja voi mahdollisesti vähentää tarpeetonta kilpirauhasen poisleikatuista. Tämä voi merkittävästi vähentää sairastavuutta liittyvät aiheetonta kirurgian ja tarjota entistä järjestelmällisempää lähestymistapaa tunnistamista ja hallintaa korkean riskin potilailla. Nämä havainnot edellyttävät validointi suuremmassa kohortin potilaista hahmotella sen potentiaalia lisänä Sytologinen tai histologisia havaintoja. Toiminnallinen merkitys biotinidaasiprekursori kehittämiseen ja /tai eteneminen syövän vielä tunneta. Tuloksista ilmeni kuitenkin Tutkimuksemme osoittavat laskua biotinidaasiprekursori tasoilla aggressiivinen kilpirauhasen karsinoomat.

Klassisen ikä, sukupuoli, kasvaimen vaiheessa ekstratyroidaalisen laajennus (levisi ulkopuolella kilpirauhasen kapseli), imusolmukestatuksesta, histologia tyyppi, histologia luokan kaikki on prognostista merkitystä ja havaittiin olevan yhteydessä biotinidaasiprekursori ilme tutkimuksessamme. Määrittämään itsenäinen ennustetekijöitä merkitys biotinidaasiprekursori, kaikki nämä tavanomaiset merkkiaineiden huono ennuste for kilpirauhassyöpä liitettiin Monimuuttuja malli ja lisäksi merkitystä biotinidaasiprekursori arvioitiin. Kuitenkin monimuuttujamenetelmin ekstratyroidaalisen laajennus ja imusolmukestatuksesta noussut merkittävämpi kuin biotinidaasiprekursori markkereina huonoon ennusteeseen (p = 0,015, HR = 4,1, 95% CI = 1,3-12,8, ja p = 0,035, HR = 5,6, 95% CI = 1,1-27,8 vastaavasti). Koska yhdistys biotinidaasiprekursori perinteisiin merkkiaineita huono ennuste, biotinidaasiprekursori ei ole itsenäistä prognostista merkitystä tässä tutkimuksessa kohortissa. Siitä huolimatta meidän havainnot ovat merkittäviä niiden rajallisen tutkimuksia biotinidaasiprekursori ihmisen syövissä; tärkeintä näitä muutamia raportteja vahvistaa ja tukea havaintoihin.

Rooli biotinidaasiprekursori pelaa syöpä aggressiivisuus on vielä selvittämättä. Todennäköinen hypoteesi keskittyvät pääasiassa roolista biotiinin toisena tekijä lukuisia vastaavien entsyymien kromatiinirakenteeseen ja vakautta. Biotinidaasiprekursori pilkkoo biosytiinin jolloin vapaa biotiini helposti saatavilla. Menetys tämän entsyymin myöhemmin aiheuttaa biotiini puutostilaan mikä puolestaan ​​vaikuttaisi histoni biotinyloinnilla kromatiinin remodeling. Tiedetään, että biotinyloinnin K12 in histoni H4 on tärkeää korjaus DNA ja heterochromatin rakenteita sekä tukahduttaminen geenien ja transposoneista ylläpitää genomista vakautta ja alentaa syöpäriskiä ihmisen soluissa ja

banaanikärpänen

[8] . Voitaisiin arveltu, että biotiini puute voi johtaa kriittiseen epigeneettiset muutokset syövän liittämällä aggressiivinen fenotyyppi sen prosessissa. Olipa menetys biotinidaasiprekursori näyttelee toiminnallista roolia tai liittyy syöpään aggressiivisuus on vielä käsiteltävä tulevissa tutkimuksissa. Siitä huolimatta meidän havainnot ovat hyödyllisiä ja niitä sovelletaan kliiniseen käyttöön yksin tai yhdessä muiden biomarkkereiden (t) diagnoosi ja /tai prognoosi aggressiivisen kilpirauhassyövän.

BRAF (V600E) pidetään negatiivisena prognostinen markkeri PTC ja ehkä ollut hämmentävä ennustetekijä analyysimme. Yksi rajoituksista Tutkimuksemme on varattujen BRAF (V600E) mutaatio tiedot meidän kohortin kilpirauhassyövän potilaille. Suurin osa PTC aloitetaan geneettinen tapahtumia, joihin mutaatio BRAF tai RAS ja alueelta toiselle siirtäminen tuottaa RET /PTC onkogeenien [15]. BRAFV600E mutaatio löytyy noin 40% PTC ja yli 50% huonosti eriytetty kilpirauhassyövän [16], [17]. Konstitutiivinen aktivointi BRAF aiheuttaman BRAF (V600E) mutaatio johtaa aktivoinnin RET /RAS /BRAF /MAPK signaalinvälitysreitin ja on tärkeä rooli solujen lisääntymisen säätelemällä sykliini D ja p27 [18]. Tämä mutaatio liittyy myös vähentynyttä ilmentymistä mRNA varten natriumjodidia symporter ja TSH-reseptori, markkereita kilpirauhasen erilaistumista [19]. BRAF mutaatio liittyy etenemiseen PTC huonosti eriytetty kilpirauhasen karsinoomat, koska lisääntynyt herkkyys TGF-indusoidun epiteelin-mesenkymaalitransitioon (EMT) [20], ja verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF) yli-ilmentymisen ja siihen liittyvä suurempi riski etäpesäke, toistumisen ja lyhyempi taudista vapaan eloonjäämisen [21], [22]. Suuri osa BRAF (V600E) alleeleja määrittelee PTC molekyyli- alatyyppi ja ennustaa huonompi sairaus tulos [23], [24] ja analysointi BRAF mutaatioiden pyrosekvensointi on hiljattain osoitettu olevan hyödyllistä tarkentaa riskien kerrostuneisuus PTC potilaiden [ ,,,0],25]. Kuitenkin selittämätön ristiriitaisia ​​tuloksia ovat myös raportoitu kirjallisuudessa. Tuore tutkimus osoitti BRAF (V600E) on yleinen suomalainen potilailla, joilla on alhainen riski PTC mutta ei ennusta uusiutumisen jälkeen pitkän aikavälin seurannassa, joiden hoito koko kilpirauhanen ja radiojodiannoksen jäännös ablaatio [26]. Toisessa tuoreessa tutkimuksessa mukana 4585 peräkkäistä potilasta, jotka todettiin pahanlaatuinen tai määrittelemätön kilpirauhasen kyhmyt ultraäänitutkimuksella, BRAF (V600E) mutaation analyysi käyttämällä kolmea riippumatonta molekyylitason analyysit FNA sytologia yksilöitä ei osoittanut mitään merkittävää korrelaatiota multifocality, ekstratyroidaalisen laajennus, ja imusolmukkeiden etäpesäke [27]. Etsintä suhdetta alennetaan biotinidaasiprekursori, BRAF (V600E) mutaatio ja aggressiivinen kilpirauhasen syövät sekä sairauden ennustetta suurempi riippumaton ikäluokat tämän pahanlaatuisen muodostaa aiheena tulevissa tutkimuksissa. Tämä ei heikennä merkitystä Tutkimuksessamme joka on ensimmäinen korostaa yhteys biotinidaasiprekursori ja kilpirauhasen syöpä ja yksi harvoista, jotka havainnollistavat ja vahvistaa orastavaa todisteita siitä biotinidaasiprekursori tekijänä syövässä aggressiivisuutta. Muita työtä tällä alalla toisivat ratkaiseva valo mekanismi aggressiivisuutta kilpirauhassyöpä sekä tukea löytö tuntematon mekanismi (t), jotka voivat selittää potentiaalin biotinidaasiprekursori määrittää aggressiivisuutta kilpirauhassyövän. Tämä arvokas tieto voi antaa merkittävän lisän nykyisiin alan tutkimusta tarjoamalla uusia mahdollisuuksia tulevaisuudessa.