Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Transforming growth factor

(TGF) -β

signalointireitin, voi toimia sekä tuumorisuppressorina ja kasvaimen promoottori haimasyöpä, riippuen kasvaimen vaiheen ja solujen yhteydessä. TGF-β-reitin on ollut intensiivisen tutkimuksen mahdollisena terapeuttisena kohteena syövän hoidossa. Oletimme korrelaatiota TGF-βR2 /Smad4 ilmaisua kasvain, plasma TGF-β1 ligandi tason, geneettinen vaihtelu

TGF-B

reitin ja ennusteen haimasyövän.

Menetelmä

Tutkimme TGF-βR2 ja Smad4 proteiinin ilmentymistä koepalan tai kirurgisen näytteitä 91 sairastavien potilaiden haiman adenokarsinooma (PDAC) käyttäen immunohistokemiallisesti. Plasman TGF-β1 mitattiin 644 potilaalla on PDAC käyttäen ELISA. Kaksikymmentä-kahdeksan yhden emäksen monimuotoisuus (SNP) ja

TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3, TGF-βR1, TGF-βR2

, ja

Smad4

geenit määritettiin vuonna 1636 potilailla, joilla PDAC käyttäen Sequenom menetelmällä. Korrelaatio proteiinin ilmentymistä kasvain, plasma TGF-β1 tasolla, ja genotyypit yleisten (OS) arvioitiin Coxin suhteellisen regressiomallit.

Tulokset

ekspressoitumistaso TGF-βR2 ja Smad4 itsenäisenä markkeri ei liittynyt OS. Kuitenkin potilailla, joilla on sekä alhainen tumavärjäystä TGF-βR2 ja ydinvoiman värjäys Smad4 voi olla parempi eloonjäämisen (

P

= 0,06). Keskiarvo ja mediaani TGF-β1 oli 15,44 (SD: 10.99) ja 12,61 (kvartiiliväli: 8,31-19,04) ng /ml. Potilailla, joilla on edennyt sairaus ja yläkvartiili valikoima TGF-β1 tason oli alentanut merkittävästi selviytymisen kuin heikoimman (

P

= 0,02). Merkittävä yhdistys

Smad4

SNP rs113545983 kanssa kokonaiselinaikaa havaittiin (

P

0,0001).

Johtopäätös

Tuloksemme antaa arvokasta perustiedot koskien TGF-β-reitin haimasyövän, jota voidaan käyttää kohdennettua hoitoa kliinisissä tutkimuksissa. Korkea TGF-β1 plasmassa,

Smad4

SNP tai TGF-βR2 /Smad4 tuumoriproteiinia ilmentyminen saattaa viitata riippuvuutta tämän reitin potilailla, joilla on edennyt haimasyöpä.

Citation: Javle M, Li Y, Tan D, Dong X, Chang P, Kar S, et ai. (2014) biomarkkereita TGF-β signalointireittiä ja prognoosi Haimasyöpä. PLoS ONE 9 (1): e85942. doi: 10,1371 /journal.pone.0085942

Editor: John Souglakos, University General Hospital Heraklionin ja laboratorio kasvain solubiologian, School of Medicine, University of Kreeta, Kreikka

vastaanotettu: elokuu 12, 2013; Hyväksytty: 04 joulukuu 2013; Julkaistu: 20 tammikuu 2014

Copyright: © 2014 Javle et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat avustusta Imclone Corporation /eli Lilly ja rahoittajien varat, kokoelma varoja potilaiden haimasyöpä tai perheistään. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Tämä tutkimus rahoitettiin osittain Imclone Inc (nyt Eli Lilly). Kirjoittajat vahvistavat, että tämä rahoitus sponsorointi ei muuta niiden noudattamista kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Transforming kasvutekijä-β (TGF-β) on tärkeä rooli solukierron pysähtymisen, apoptoosin, homeostaasin, haavan paranemista ja immuuni sääntelyn. Siinä tapauksessa, syöpien, TGF-β signaloinnin lähettää kontekstisidonnaisia ​​kaksoisrooli, sekä tuumorisuppressori varhaisessa vaiheessa taudin ja kasvaimen promoottori perustettu syövissä [1]. On olemassa kolme TGF-β-isoformien, TGF-β1, 2 ja 3. Näistä TGF-β1 on yleisin ihmisissä. TGF-β signalointi tapahtuu useassa vaiheessa, alkaen aktivointi ja vapautuminen TGF-β1 seuraa sitoutuminen kolme korkean affiniteetin reseptorit (TGF-βR1, 2 ja 3). TGF-βR1 ja TGF-βR2 reseptorit dimeroituvat sitoutumisen jälkeen TGF-β solun pinnalla [2]. Nämä reseptorit, kun peräkkäin aktivoitu fosforyloivan perheen transkriptio tekijöiden Smad: ien. Viime exome sekvensointi tutkimus osoitti, että

TGF-βR2

on yksi 16 yleisimmin mutatoituja geenejä, haimasyövän [3]. Smad2 ja Smad3 aktivoituvat TGF-βR1 ja sitoutuvat yhteiseen kumppani Smad4. SMAD6 ja Smad7 ovat estävä Smad: ien, jotka estävät fosforylaatiota Smad2 tai Smad3. Aktivoitu Smad kompleksissa translokaatio tumaan säätelee transkription useita TGF-β-riippuvaisia ​​geenejä, jotka voivat olla yhteydessä riippuvainen, kasvain-suppressoiva tai progressiivinen rooli. Tämän lisäksi ”kanoniset” TGF-β-signalointireitin on olemassa erilaisia ​​solunsisäiset signaalireitit, jotka aktivoidaan TGF-β riippumatta Smad2 tai Smad3 aktivointi [4]. TGF-β signalointi on aktivoitu useita tunnettuja ihmisen syövissä, ja on siksi alue aktiivisen tutkimuksen [5].

TGF-β-reitti on yksi 12 ytimen signalointireiteissä mukana haimasyövän [6]. Mutaation vähintään yhden TGF-β-reitin geenit esiintyy 100%: n haiman kasvaimia. LOH on 18q jossa Smad4-geeni sijaitsee esiintyy 90% haiman syövät, kun taas geenin deleetioita ja menetys proteiinin ilmentymisen esiintyy 50%: [7], [8]. Menetys Smad4 (DPC4) on käytetty määrittämään haiman alkuperää tapauksissa etäpesäkkeiden tuntemattomien ensisijainen. Uskotaan, että heikentynyt TGF-β signalointi voi selittää syövän etenemisen eikä sen aloittamisesta [4]. Kuitenkin todellinen rooli Smad4 haimasyövän pidetään edelleen kiistanalainen. Esimerkiksi Biankin

et al

osoittaneet Smad4 ilmaus osuus huonompi ennuste tapauksessa kirurgisesti kokoisen tauti; potilaalla on Smad4 yliekspressio ei hyötynyt kirurginen resektio tutkimuksessaan [9]. Toisaalta, nopea ruumiinavaus tiedot viittaavat siihen, että Smad4 menetys liittyy levitetään tautiin [10]. On rajallisesti tietoa TGF-β-reseptorin ja Smad4 ilmaisun tai niiden ennustetekijöiden merkitys kehittyneen haimasyövän potilaille. Lisäksi ei ole olemassa tietoja, jotka koskevat TGF-β1 plasmassa haimasyövän ja sen korrelaatio ennustetta.

Genetic muunnelmia TGF-β-reitin geenit on raportoitu rinta-, munasarja-, paksusuoli-, ei-pienisoluinen keuhko- ja paksusuolen syöpää ja voi ennustaa syöpäalttiutta tai olla prognostista merkitystä [11] – [15]. On kuitenkin olemassa mitään tietoja tietojemme suhteen sama haimasyövän. Oletamme, että TGF-β-reitin aktivaatio on yleistä haimasyövän ja geneettisiä muunnelmia koulutusjakson, plasma TGF-β1 tason ja kasvaimen TGF-βR2 tai Smad4 ilmaisu liittyy kliininen tulos haimasyöpä. Tunnistaminen kohortin haimasyövän tapauksissa, joissa -systeemi aktivoituu voi johtaa potilaan valinta TGF-β-täsmähoitoihin.

Methods

Potilasjoukko ja Biospecimens

kaikki potilaat, joilla patologisesti vahvistettu haiman adenokarsinooma (PDAC) ja jotka allekirjoittivat tietoisen suostumuksen potilaskertomuksen lue ja kiinnekohta tutkimukset tutkimukseen otettiin mukaan. Institutionaalinen Review Board of MD Anderson Cancer Centerin hyväksyi tutkimuksen. Kliinistä tietoa mennessä potilaan diagnoosin, kuolin- tai viime seurannasta, tuumoriresektion tila, kliininen kasvain vaiheessa ja seerumin hiilihydraattiantigeeniä 19-9 (CA19-9) diagnoosin noudettiin potilailta potilastietoja. Kudosnäytteitä, plasma ja kasvainten DNA haettiin MD Anderson kudospankkiyhdistys.

immunohistokemia

Immunohistokemia suoritettiin formaliiniin parafiiniin upotetut (FFPE) kohdat. Ensisijainen vasta-aineita TGF-βR2 (Novus Biologicals, LLC, Littleton, CO) ja Smad4 (Proteintech Group, Inc. Chicago, IL) käytettiin 1:350 ja 1:450 laimennoksia, vastaavasti. Vasta-aine kompleksi havaittiin käyttäen ABC-kitti (Vector Laboratories, Burlingame, CA). Ydin- ja sytoplasma värjäys kirjattiin molempien markkereita. Värjäytymisintensiteettiä pisteytettiin 0 negatiivinen, 1 heikkoja, 2 keskitason, ja 3 vahvan värjäystä. Prosenttiosuus solujen positiivista värjäytymistä pisteytettiin 0 = ei, 1 1-50%, ja 2 50%. Lopullinen värjäytyminen pisteet oli voimakkuudesta ja prosenttiosuus tulokset. Jokainen dia arvioitiin kaksi tutkijaa (DRS. Dongfeng Tan ja Yanan Li) ja johdonmukaista tietoa sekä arvioijien käytettiin lopullisessa tilastolliseen analyysiin.

Plasma taso TGF-β1

Plasma tasolla TGF-β1 mitattiin Immuunijärjestelmän Monitoring Core Laboratory of MD Anderson käyttäen MSD® 96-Well MULTI-ARRAY®Human TGF-β1 Assay kit (Meso Scale Discovery, Rockville, MD). Kaikki näytteet analysoitiin kahtena kappaleena ja kutakin määritystä oli positiivinen ja negatiivinen kontrolli. Varianssi kaksoisnäytteillä oli alle 10%. Kaikki potilaat mukana tässä määrityksessä rekrytoitiin tapaus verrokkitutkimuksessa MD Anderson Cancer Center [16], [17]. Verinäytteet kerättiin ennen syövän hoitoon tai diagnoosin aikana 95%: ssa tapauksista. Plasmanäytteet oli varastoitu -80 ° C: ssa ilman sulatus ennen käyttöä tässä määrityksessä.

Genotyypin

DNA uutettiin periferaalisen lymfosyytit suurin osa näytteistä ja FFPE 27 näytettä. Genotyypitys käytetään Sequenom menetelmällä kuten aikaisemmin on kuvattu [18]. Kaikkiaan 28 SNP

TGF-β1

,

TGF-β2

,

TGF-β3

,

TGF-βR1

,

TGF-βR2

ja

Smad4

geenit valittiin keskittyen potentiaalisesti toiminnallinen SNP eli SNP koodaavan alueen (nonsynonymous tai synonyymi), transloimaton alue (UTR), promoottorialue ja silmukointipaikoista, tai ins /del ja runko-shift SNP. SNP tunnistettiin NCBI SNP tietokanta ja SNP500 Cancer tietokannan kautta tai kirjallisuuskatsauksen ja toiminnallinen analyysi käyttäen F-SNP-ohjelmisto (https://compbio.cs.queensu.ca/F-SNP/). Noin 10% näytteistä analysoitiin kahtena kappaleena ja ristiriitaisten tietojen jätettiin lopullisen tilastollisen analyysin.

Tilastollinen analyysi

IHC pisteet ja plasman TGF-β1 tasot esitettiin keskiarvo ± keskihajonta . Keskimääräinen ero ryhmien välillä verrattiin käyttäen Studentin t-testiä. Liitot Näiden merkkiaineiden ja OS analysoitiin käyttämällä Kaplan Meier juoni, log-rank-testi ja Coxin suhteellisten riskien malleja oikaistu sukupuolen, rodun, iän, kasvaimen vaiheesta, ja CA19-9 tasolla. Näitä markkereita analysoitiin myös kategoriseksi muuttujia käyttämällä mediaani tai kvartiilit kuin raja-arvot.

Jakelu genotyyppien tutkittiin Hardy-Weinberg tasapainossa hyvyys fit khiin neliö testi. Genotyypin ja alleelin taajuus SNP määritettiin suoralla geeni laskenta. Homotsygoottinen ja heterotsygoottinen genotyypit yhdistettiin jos taajuus homozygoottisia oli hyvin alhainen tai jos molemmat genotyypit oli sama suuntaus vaikutus [esimerkiksi lyhyempi kokonaiselossaoloaika (OS) verrattuna tarkoite ryhmä]. Yhdistyksen välinen genotyypin ja OS arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier juoni ja log-rank-testi. Hazard suhde (HR) ja 95%: n luottamusväli (CI) arvioitiin käyttäen Coxin monimuuttuja regressio suhteellisten riskien mallia. Kaikki tilastolliset testausta käytetään SPSS ohjelmistoa (SPSS Inc., Chicago, IL).

P

arvo 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä. Väärät positiiviset havainto liittyy useita testaus valvoi Bonfferoni korjausta.

Tulokset

Tutkimus väestö tunnistettiin tapauskontrollitutkimuksessa on haimasyövän suoritettiin Teksasin yliopiston MD Anderson Cancer Center vuodesta 1999 kautta 2012 [16], [17]. Kolme potilasryhmille tunnistettiin: 1) 120 potilasta oli riittävä koepalan tai kirurgiset näytteitä immunohistokemian; 2) 644 potilaalla oli verinäytteet kerätään plasman TGF-β1 mittaus; ja 3) 1636 potilaalla oli riittävästi DNA-näytteitä saatavilla genotyypin määritystä. Väestörakenteen ja kliinisiä tekijöitä kolmesta tutkimuksen populaatiot kuvataan taulukossa 1. ikä, sukupuoli ja rotuun /etniseen jakaumat potilaista oli edustaja MD Anderson potilasryhmässä. Keskimääräinen ikä on 60,6, 61,4 ja 62,1 vuotta potilaille sisältyvät IHC, ELISA ja genotyypitys tutkimus, vastaavasti. Men koostui 72,5%, 61,5% ja 59,0% kolmen tutkimuksen populaatioita. Yli 85% koehenkilöistä oli ei-latinalaisamerikkalainen valkoiset. Lähes 74%: lla potilaista IHC ryhmässä oli etäpesäkkeitä ja siksi kudosnäytteiden käytetään IHC olivat enimmäkseen biopsianäytteissä [Vaihe II: 8 (8,8%); Vaihe III: 16 (17,6%); Vaihe IV: 67 (73,6%)]. Tiedot kasvaimen oli saatavana 60 näytettä, joista 20 oli kohtuullisesti erilaistunut ja 40 olivat huonosti eriytetty kasvaimia.

Protein Expression

Yhteensä 91 näytettä värjättiin TGF- βR2 ja Smad4. Määrällinen arviointi saavutettiin 88 näytteitä TGF-βR2 ja 81 näytettä Smad4 (Fig. 1). Ydin- ja sytoplasma värjäytyminen havaittiin vastaavasti 81 (92%) ja 87 (99%) näytteistä TGF-βR2 ja 47 (58%) ja 72 (89%) näytteistä Smad4 (Fig. 1). Yleisenä IHC pisteet joko markkeri ei liittynyt OS (tuloksia ei ole esitetty). Potilaat, joilla on korkeampi tumavärjäystä sijoituksen TGF-βR2 oli suhteellisesti lyhyempi OS kuin ne, joilla on alhaisempi pistemäärä (keskimääräinen elinaika [MST] 12,0 vs. 8,6 kuukautta, taulukko 2), mutta tämä ero ei ollut tilastollisesti merkitsevä. Nuclear värjäys Smad4 oli läsnä useammin (16/20, 80%) huonosti eriytetty kasvaimia kuin kohtuullisesti erilaistunut kasvaimissa (19/40, 47,5%) (

P

= 0,016, χ

2 testiä ). Lisäksi kun TGF-βR2 ja Smad4 ydin- ilmentyminen analysoitiin yhdessä, olemme huomanneet, että potilaalla on matala TGF-βR2 ja korkea ilmentyminen Smad4 oli huomattavasti pidempi OS kuin toiset (Fig. 2), vaikka tämä ero ei ollut tilastollisesti merkittävä oikaisun jälkeen muissa kliinisissä ennustavia (taulukko 2).

V: Positiivinen ydin- TGF-βR2 kohtalaisen eriytetty adenokarsinooma haiman (Suurennus: 10 x 40). B: Positiivinen ydin- ilmaus Smad4 kohtalaisen eriytetty adenokarsinooma haiman (Suurennus: 10 x 40).

tumavärjäystä 0-1 määritellään alhaalla TGF-βR2 ja pistemäärä 0 alhaiset Smad4. Punainen viiva: TGF-βR2 on korkea ja Smad4 on alhainen (HL); musta viiva: molemmat korkea (HH); vihreä linja: molemmat ovat pieniä (LL); violetti linja: TGF-βR2 on alhainen ja Smad4 on korkea (LH). Eloonjäämisaika ajat ovat 7,8, 8,6, 11,3, 15,6 kuukautta HL, HH, LL ja LH-ryhmässä. Log-rank-testi P-arvot ja tulokset Coxin regressioanalyysi on esitetty taulukossa 2. Siten TGFp-R2 /Smad4 suhde voi olla prognoosi-, alhainen arvot, jotka vastaavat parannetun selviytymisen.

Plasma TGF-β1 Level

Plasma taso TGF-β1 mitattiin 644 potilaalla. Keskiarvo ja mediaani TGF-β1 oli 15,44 (SD 10.99) ja 12,61 (kvartiiliväli: 8,31-19,04) ng /ml, vastaavasti. Taso TGF-β1 oli suhteellisesti suurempi potilailla, joilla paikallinen kasvain kuin kehittyneitä kasvaimia. Keskimääräinen ± SD TGF-β1 taso oli 17,2 ± 14,3, 13,9 ± 8,7 ja 15,5 ± 10,0 ng /ml potilailla, joilla paikallisia, paikallisesti edennyt ja etäpesäkkeitä, vastaavasti (

P

= 0,02, ANOVA). Kuitenkin taso TGF-β1 ei liittynyt OS potilailla, joilla oli paikallinen kasvain (taulukko 3) tai koko tutkimuspopulaatiossa (MST = 12,9 ja 11,1 kuukautta niille jotka alakvartiilit verrattuna niihin ylimpään neljännekseen alue,

P

= 0,78, log-rank-testi). Kuitenkin potilailla, joilla on paikallisesti edennyt tai etäpesäkkeitä ja yläkvartiili valikoima TGF-β1 tason oli alentanut merkittävästi selviytymistä kuin heidän kollegansa (taulukko 3). TGF-β1 pysyi merkittävänä ennustin on Coxin regressiomallin korjattuna väestönkehitystä ja muut kliiniset tekijät.

genotyypin

Genotyping suoritettiin vuonna 1636 potilaalla. Raportoitiin pienet alleelin frekvenssi ja mahdolliset toiminnalliset merkitys 28 testattujen SNP on kuvattu taulukossa 4. Ei variantti alleeli havaittu yhdeksän SNP. Niistä kuusi yhteistä SNP vähäisin alleelin taajuus on suurempi kuin 5%, kolme seurasi Hardy Weinberg Equilibrium (HWE) ja kolme poikkesi HWE (taulukko 2). Genotyyppijakauman ja kokonaiselossaoloaika aikaa genotyyppi 19 informatiivinen SNP on esitetty taulukossa 5. Merkittävä yhdistys

Smad4

SNP rs113545983 OS havaittiin (paneeli A, Fig. 3), ja yhdistys oli voimakkaampi potilailla, joilla on pitkälle edennyt sairaus (Paneelit C ja D, Fig. 3) kuin ne, joilla on paikallinen tauti (paneeli B, Fig. 3). Mutantti G alleelin SNP rs113545983 pysyi merkittävänä ennustaja kuoleman Coxin regressiomallin säätämisen jälkeen vaiheessa ja resektion tila kaikkien potilaiden (HR: 1,54, 95% CI: 1,21-1,96,

P

0,001). Mikään muu SNP osoittivat merkittävää yhteyttä OS. TGF-βR2 SNP rs2248048 oli heikko yhdessä OS ilman tilastollista merkitystä (

P

= 0,09, log rank -testi).

sininen viiva: AA genotyyppi; vihreä linja: AG /GG-genotyyppi. AA genotyyppi liittyi parantunut selviytymistä koko tutkimuspopulaatiossa. On Alaryhmäanalyysissä, tämä selviytyminen ero oli enemmän merkitystä edenneen taudin vaiheessa. P-arvot log-rank-testi ovat 0,0001, 0,369, 0,007, ja 0,031 paneeleille A, B, C ja D, vastaavasti.

Keskustelu

Tavoitteemme nykyisessä oli tutkia biologisten merkkiaineiden TGF-β polku, joka voi olla ennusteen arvioinnissa ja mahdollisesti ennustearvo täsmähoitoihin estäjillä. Olemme kuulustelleet kasvain biorepository MD Anderson Cancer Center ja tutkittiin arkistomateriaalia lukien DNA, plasma ja kasvaimen kudosnäytteiden SNP, TGF-β1 plasmassa ja proteiinien TGF-βR2 ja Smad4. Havaitsimme, että potilaalla on matala TGF-βR2 ja korkea ilmentyminen Smad4 niiden kasvainten oli huomattavasti pidempi OS kuin muiden alaryhmien tutkimuksessamme. Olemme myös huomanneet, että potilailla, joilla on edennyt sairaus ja korkea TGF-β1 plasmassa oli alentanut merkittävästi selviytymisen kuin pienemmällä TGF-β1. Lopuksi, havaitsimme merkittävän yhdistys

Smad4

SNP rs113545983 potilaan selviytymistä. Nämä havainnot antavat arvokasta perustason tiedot TGF-β-signalointireitin haimasyövän, jota voidaan käyttää jatkossa täsmähoitoihin kliinisissä tutkimuksissa. TGF-β signalointireitin sisältää ligandit ja reseptorit; ja ligandi-reseptori-vuorovaikutusten johtaa signaalin transduktion Smad: ien. Edellinen IHC analyysi on osoittanut läsnäolon ligandin TGF-β1, TGF-β2 ja TGF-β3 in PDAC syöpäsoluissa ja läsnäolo TGF-β2 liittyi kehittynyt kasvain vaiheessa [19]. TGF-βR2 mRNA: ta ilmennettiin useimmissa syöpäsoluissa ja parantaakseen TGF-βR2 on ehdotettu olevan rooli säätelyssä ihmisen haiman syöpäsolujen kasvua [20].

TGF-β2R

ja

Smad4

geeni mutatoitunut 4% ja 50% ihmisen PDAC vastaavasti [21]. Puute Smad4 ilmaisun kasvain on liittynyt aggressiivisempi sairaus [22]. On hyvin vähän tietoa tutkimalla ennusteen arvioinnissa TGF-β-reitin proteiinit kehittyneen haimasyövän potilaille. Vaikka emme löytäneet merkittävää korrelaatiota Smad4 ja TGF-βR2 ilmentyminen yksilöllisesti ennusteeseen, havaitsimme, että TGF-β2R ja Smad4 proteiinin ilmentymistä havaittiin 81% ja 47%: n kasvaimia ja potilaalla on matala TGF-βR2 ja korkea ilmentyminen Smad4 oli huomattavasti pidempi OS kuin muiden alaryhmien tutkimuksessamme. Hua et ai, raportoitu samankaltaisia ​​löydöksiä pienemmässä retrospektiivinen tutkimus potilailla, joilla on edennyt haimasyöpä [23]. Tekniikan tutkimus meidän laitoksen ehdotti, että Smad4 menetys korreloi negatiivisesti tulokseen potilailla, joilla on paikallisesti edennyt haimasyöpä vastaanottaa gemsitabiini, oksaliplatiini ja setuksimabi [24]. Kuten aiemmin mainittiin, Smad4 menetys liittyi taudin levittämisen paikallisesti edenneessä ja metastasoituneen haimasyövän tapauksissa Iacobuzio-Donahue, et al ruumiinavaus sarjassa [10]. Toisaalta, kirjallisuuteen perustuva meta-analyysi biologisten merkkiaineiden toiminut haimasyövän ei tukenut ennustetekijöiden arvo Smad4 kirurgisesti kokoisen tauti [25]. Nämä havainnot ovat sopusoinnussa vaiheessa riippuva roolia TGF-β-reitin.

Lisäksi olemme havainneet, että potilailla, joilla on pitkälle edennyt sairaus ja korkea TGF-β1 plasmassa oli alentanut merkittävästi selviytymisen kuin ne, joilla on alhaisempi TGF β1 tasolla. Tätä yhteyttä ei havaittu potilailla, joilla oli paikallinen sairaus. Aikaisempi tutkimus on osoittanut, että puute TGF-β1 ilmentyminen kasvaimen kudoksissa oli yhteydessä lisääntyneeseen leikkauksen jälkeisiä selviytymisen [19]. Syy yhdistyksen välillä korkea TGF-β1 plasmassa ja huono eloonjääminen kehittyneen taudin vaiheessa (eikä alkuvaiheessa tauti) on epäselvä. Nämä tulokset ovat yhdenmukaisia ​​prekliinistä tietoa, joka viittaa, että menetys kasvua estävän vaste TGF-β signalointi vaihtelee suoraan pahanlaatuisia vaiheessa kasvain ja aggressiivisempi muodot todella siirtyä autokriinisiä ja /tai parakriinisellä piristämä TGF- β. Kasvaimet voivat myös erittää TGF-β1 johtaa muuttunut kasvaimen vastaisen immuniteetin [26], [27]. Tietääksemme ei ole etukäteen tietoa tutkimalla ennustetekijöiden roolia TGF-β1 plasmassa haimasyövän. Ennen tutkimukset rinta-, eturauhas-, ruokatorven ja virtsarakon syöpä osoittavat korrelaatiota korkean TGF-β1 plasmassa ja huonon ennusteen [28] – [31]. Se on näiden raporttien ja suhteellisen suuri otoskoko Tutkimuksemme lisää vahvuus havainnoista. Koska vaikeaa saada kohdekudoksissa potilailla, joilla on pitkälle edennyt tauti, plasman biomarkkereita TGF-β1 reitti voi olla suurempi kliininen arvo.

Genetic muunnelmia TGF-β-reitin on liitetty ennustetta ja eloonjääminen keuhkosyöpä toisessa tutkimuksessa meidän laitokselle. Saavilla potilailla platinapohjaisen kemoterapian; BMP2: rs235756 ja Smad3: rs4776342 liittyi merkittävästi selviytymisen [15]. On kuitenkin olemassa mitään tutkimuksia haimasyövän korreloivia genomista muunnelmia tämän reitin kanssa ennustetta. Totesimme Merkitsevä yhteys

Smad4

SNP rs113545983, synonyymi SNP, OS tässä tutkimuksessa. Potilaat kantavat variantti alleeli oli huomattavasti lyhyempi OS ja lisääntynyt riski kuolla oikaisun jälkeen muissa kliinisissä ennustajia. Tämä SNP on synonyymi SNP, joka ei tuota muuttunut koodaussekvenssit ja aminohapposubstituution. Kuitenkin aikaisemmassa tutkimuksessa on osoitettu, että samaa SNP voi johtaa proteiiniin tuote muuttunut huumeiden ja estäjä yhteisvaikutuksia 32. Siten toiminnallinen seurauksena tämän SNP on tutkittava. On myös mahdollista, että tämä SNP on kytkentäepätasapainossa muiden toiminnallisten SNP tämän geenin tai tärkeitä geenejä tässä kromosomissa paikassa. Lisätutkimukset auttaa määrittämään, kuinka tämä SNP on toiminnallisesti liittyy Smad4 signaalitransduktioreittiin ja eloonjäämisen haiman syöpäpotilaiden.

Tutkimus on useita rajoituksia. Koska rajoittamisesta kudosnäytteitä ja alhaisen MAF SNP valittu tutkimukseen, emme voineet tutkia korrelaatio genotyyppien, plasman markkeritaso ja kudosten markkereita. Olemme mitataan vain muutaman valittu markkereita monia molekyylejä, jotka ovat mukana tämän monimutkaisen signalointireitin. Kuitenkin, tietomme antavat arvokasta perustason tietoa tämän reitin ilmentymistä haimasyövän, jota voidaan käyttää kohdennettua hoitoa kliinisissä tutkimuksissa. Perustuen Edellä esitettyjen havaintojen perusteella voidaan hypoteesi, että havaitseminen korkean TGF-β1 plasmassa, SMAD4SNP rs113545983 tai korkean TGF-βR2 /Smad4 tuumoriproteiinia ilmentymisen suhde voi ehdottaa riippuvuutta tämän reitin potilailla, joilla on edennyt haimasyöpä ja tämä osajoukko voi mahdollisesti hyötyä TGF-β-täsmähoitoihin.