Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

epiteelikasvaimet munasarjasyöpä on merkittävä kuolinsyy sekä Yhdysvalloissa että maailmanlaajuisesti, mikä johtuu suurelta osin suuri osa tapauksista, jotka esittävät myöhäisessä vaiheessa, kun selviytyminen on erittäin huono. Varhainen havaitseminen epiteelin munasarjasyöpä, ja vakavien alatyypin erityisesti, on lupaava strategia säästää ihmishenkiä. Alhainen esiintyvyys munasarjasyöpä tekee kehittämään riittävän herkkä ja spesifinen testi perustuu veren merkkiaineita hyvin haastava. Arvioimme suorituskykyä joukko ehdokas veren merkkiaineiden ja näiden yhdistelmiä merkkiaineiden havaitsemisessa vakavasta munasarjasyöpä.

menetelmät ja havainnot

Valitsimme 14 ehdokasta veren merkkiaineiden vakavien munasarjasyövän jolle määritykset oli saatavilla mitata niiden pitoisuuksia seerumissa tai plasmassa, perustuvat analyysiin maailmanlaajuisia geenien ilmentyminen tietoja ja kirjallisuushakuja. Arvioimme suorituskykyä näiden ehdokas merkkiaineiden erikseen ja yhdessä mittaamalla niitä päällekkäistä seerumin (tai plasmaa) näytteiden naisilla, joilla on kliinisesti havaittavissa munasarjasyöpä ja naisten, munasarjasyöpä. Perustuen herkkyys korkealla spesifisyys, olemme päättäneet, että 4 14 ehdokkaan markkereita-MUC16, WFDC2, MSLN ja MMP7-edellytä lisäarviointia arvokas seerumin kerätyt näytteet kuukausia tai vuosia ennen kliininen diagnoosi voidaan arvioida niiden käyttökelpoisuutta varhaiseen havaitsemiseen. Olemme myös raportoitu eroja suorituskykyä näiden ehdokas veren merkkiaineiden poikki histologisia tyyppejä epiteelin munasarjasyöpä.

Johtopäätökset

systemaattisesti analysoimalla suorituskyvyn ehdokas veren merkkiaineiden munasarjasyövän erottamaan naisilla, joilla on kliinisesti näennäinen munasarjasyöpä naisilta ilman munasarjasyövän tunnistimme joukko seerumimarkkereiden riittävän suorituskyvyn takaa testaus niiden kyvystä tunnistaa munasarjasyöpä kuukausia tai vuosia ennen kliinistä diagnoosia. Me puolusti tärkeyttä herkkyys suuri spesifisyys ja suuruuden ero markkeritasoihin tapausten ja kontrollien välillä kuin suorituskyvyn mittaamisen ja osoitti merkityksen kerrostamiselintä Analysointikapasiteetin histologinen tyyppi munasarjasyöpä. Lisäksi olemme keskustelleet rajoituksista tutkimusten (kuten tämä), jotka käyttävät näytteestä saatujen oireenmukaista naisten arvioida mahdollisia käyttökelpoisia havaitseminen taudin kuukausia tai vuosia ennen kliinistä havaitsemista.

Citation: Palmer C, Duan X, Hawley S, Scholler N, Thorpe JD, Sahota RA, et ai. (2008) järjestelmällinen arviointi Ehdokas Veren tussit havaitseminen munasarjasyöpä. PLoS ONE 3 (7): e2633. doi: 10,1371 /journal.pone.0002633

Editor: Michael Goodyear, Dalhousien yliopisto, Kanada

vastaanotettu: 06 helmikuu 2008; Hyväksytty 4. kesäkuuta 2008; Julkaistu: 09 heinäkuu 2008

Copyright: © 2008 Palmer et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Olemme kiitollinen antelias rahoitusta Kanarian Foundation, Tyynenmeren Munasarjojen Cancer Research Consortium (POCRC) /SPORE munasarjasyövässä (P50 CA83636, NU), NIH /NCI Grant 1 RO1 CA75494 (Quest), sekä British Columbia Cancer Foundation. POB on tutkija ja Howard Hughes Medical Institute. CP ja SJH ovat työntekijöitä Kanarian Foundationin ja olivat mukana tutkimuksen suunnittelu, analysointi ja tietojen tulkinta, ja valmistelu käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

Johdanto

epiteelikasvaimet munasarjasyöpä (EOC) on korkein kuolleisuus kaikista gynekologisten syöpien ja on viidenneksi suurin syy syövän kuolemaan naisten Yhdysvalloissa. Vuonna 2007 oli 22430 uutta tapausta EOC ja arviolta 15280 kuolemantapausta Yhdysvalloissa [1]. Viiden vuoden eloonjäämisaste EOC Yhdysvalloissa on noin 45%, mikä johtuu suurelta osin suuri osa EOCs joita ei voida havaita ennen kuin ne ovat levinneet ulkopuolella munasarja [2]. On olemassa neljä suurta histologisia tyyppejä EOC: vakavien, endomet-, kirkas solu, ja mucinous. Nämä neljä histologiset tyypit ovat erittäin erilaisia, sekä kliinisessä että molekyylitason ominaisuudet. Vakavien alatyyppi on yleisimmin diagnosoitu ja on vastuussa suurimmasta munasarjasyöpä kuolemia [2].

varhainen havaitseminen on lupaava tapa vähentää kuolleisuutta syöpiä, jotka ovat useimmiten diagnosoitu niiden loppuvaiheissa [3]. Koska histologisia tyyppejä munasarjasyöpä ovat luonnostaan ​​erilaisia ​​sairauksia, optimaalinen strategioiden varhaista toteamista, ja kustannus-hyöty-laskelmia arvioitaessa hänen toimintaansa, voi olla erilainen jokaisen alatyypin. Mahdollinen hyöty varhaisen havaitsemisen on suurin vakavasta EOC koska se on yleisin ja tappava munasarjasyövän alatyyppi, ja se on siis ollut ensisijainen kohde pyrkimyksiämme.

kliininen hyöty diagnostinen testi on usein ilmaistuna positiivinen ennustearvo (PPV) -edellä osa testin positiivisia jotka ovat totta positiivisia. Perusteltuna kliiniseen käyttöön, diagnostinen testi on saavuttaa PPV joka tasapainottaa edut varhaista havaitsemista vastaan ​​kustannukset testin ja riskejä vääriä positiivisia (esim ahdistuneisuus, tarpeeton leikkaus). PPV vähintään 10%, mikä tarkoittaa, että 10% naisista, jotka testi positiivinen todella on sairaus, on usein käytetty hieman mielivaltainen tavoite varhaisen havaitsemisen testi munasarjasyöpä [4]. Merkittävä tekijä haasteellisuus varhaisen havaitsemisen serooseista EOC on alhainen taudin esiintyvyyden väestössä, mikä tarkoittaa sitä, että seulonta testi on oltava erittäin spesifisiä, jotta vältetään yli-diagnoosin ja yli-hoitoa. Väestössä, saavuttaa PPV 10%, suorituskyky vaatimukset ovat erittäin korkeat: annetaan ikävakioitu vuosittainen ilmaantuvuus osuus kaikista EOC naisilla yli 50-vuotiaana USA 35 per 100000 [5], testi must saavuttaa 99,7% spesifisyys 80% herkkyys. Spesifisyys tarvitaan valikoivaa havaitsemiseksi vakavien alijoukon EOC väestössä (joka on harvemmin kuin kuvassa yllä) olisi vastaavasti suurempi. Sen saavuttamiseksi PPV 10% havaitsemiseksi serous EOC joukossa BRCA1-mutaation kantajia, testi on saavutettava spesifisyys vaatimus 78,1% 80% herkkyys annettu ilmaantuvuus vakavien munasarjasyövän yli 50-vuotiaana tässä potilasryhmässä on noin 3000 tapausta 100000 [6]. On pidettävä mielessä, että tämä esitys voitaisiin saavuttaa yhteinen suoritus verikokeen kuin ensilinjan näyttö ja seuranta kuvantaminen testi. Lisäksi kynnys hyväksyttävän PPV riippuu intervention ja se voi olla, että PPV alle 10% voi olla hyväksyttävä.

Paras-opiskeli seerumimarkkerina munasarjasyöpä, CA125 (MUC16), on ollut arvioitu laajasti hyödylliseksi merkki munasarjasyöpä, ja on FDA: n hyväksymä uusiutumisen seuranta. Retrospektiivisissä tutkimuksissa CA125 on osoitettu signaali tauti uusiutuu noin kuusi kuukautta ennen oireiden kehittymisen [7]. Naisilla, joilla on kliinisesti havaittu vaiheessa I EOC (eri histologialtaan), preoperatiivinen seerumissa CA125 ovat koholla ( 35 U /ml) noin 66% naisista [8]. Vuonna Janus pituus- kohortin CA125 on osoitettu sisältävän mahdollisia signaaleja veressä jo viisi vuotta ennen kliinisen havaitsemisen [9], ja on arvioitu herkkyys 45%: iin 93%: n spesifisyys 1,5 vuotta ennen diagnoosia naisilla yli 50-vuotiaita, mikä on rohkaisevaa, mutta läheskään riittävä kliiniseen käyttöön [10].

Nämä tulokset antavat tärkeä esimerkki ero merkki suorituskykyä kliinisesti diagnosoitu sairaus versus oireita edeltäviä taudin todellisen tavoite varhaisen havaitsemisen testi. Väheneminen suorituskyvyn kliinisesti diagnosoitu kasvaimia (jopa vaihe I) ennalta oireista tautia ei ole yllättävää, sillä kliinisesti diagnosoitu syövät ovat lähes varmasti yleensä paljon suurempi kuin alussa kasvaimia meidän täytyy havaita parantaa selviytymistä, ja korostaa, että on tärkeää arvioitaessa ehdokas merkkiaineiden yksilöitä oireita edeltäviä naisia. Valitettavasti rajoitusten takia näytteen saatavuuden, useimmat tutkimukset Merkittyjen suorituskyvyn (mukaan lukien tämän) ovat arvioineet suorituskyky kliinisissä näytteissä kerätty naisilla, joilla on jo oireita ja syövän.

Viime vuosina soveltaminen genomista ja proteomic teknologiat on kiihdyttänyt räjähdysmäisesti merkki löytö toimia erilaisten sairauksien, kuten EOC. Jotkut tutkimukset ovat arvioineet kahden tai useamman markkereita, jotta voidaan tunnistaa joukot, jotka toimivat parhaiten yhdessä paneelissa. Tällaiset tutkimukset ovat välttämättömiä, koska on epätodennäköistä, että mikään yksittäinen markkeri on riittävä suorituskyky havaitsemaan syöpien ennen oireiden kehittymisen. Vaikka arviointi ehdokkaan merkki panos paneelin yksilöitä naisilla, joilla on kliinisesti ilmeinen munasarjasyöpä voi olla huono ennustaja sen läpimenoaika ja hyödyllisyys varhaiseen havaitsemiseen, se on hyödyllinen suodatin päästä arvokas ennalta kliinisistä näytteistä.

sitoutui järjestelmällisesti suorituskyvyn arviointi 14 ehdokkaan veripohjaisten merkkiaineita EOC valitaan perustuen geenin ilmentymisen seurannasta ja kirjallisuudesta. Meidän ehdokas merkki sisältää listan: MUC16 (CA125), WFDC2 (HE4), MSLN, IGF2, CHI3L1 (YKL40), MMP7, MIF, PRL, SPP1 (OPN), BMP7, LCN2, IL13RA2, TACSTD1 (EpCAM), ja AMH. Huomaa, että kaikki merkit olivat tarkoitettu niiden HUGO geeni symboleja. Arvioimme näitä markkereita käyttäen yhteistä sarjaa hyvin selityksin EOC tapauksissa ja kontrolliseerumin näytteitä, mukaan lukien naisten terveitä munasarjat sekä naisten munasarjojen hyvän- ja pahanlaatuisten olosuhteissa. Tavoitteena oli käyttää suorituskyvyn näissä kliinisesti diagnosoitujen tapausten suodattimena arvioimaan, mitkä ehdokas markkereita perusteltua lisäarviointia arvokas seeruminäytteistä, jotka otetaan kuukausia tai vuosia ennen diagnoosia munasarjasyöpä. Käytimme myös näitä tietoja tehdä analyysejä markkeripaneelit (nimetty ryhmä markkereita) ja komposiitti markkereita (johon sisältyy erityinen luokittelun tai yhdistelmä sääntö) sekä tutkia vaikutus kerrostamiselintä Analysointikapasiteetin histologinen tyyppi.

tulokset

Marker Selection

valittu ehdokas markkereita käyttämällä geenien ilmentyminen tietojen geenien tunnistamiseen erittäin ilmaistaan ​​munasarjasyövän mutta ei muualla kehossa, kuten on kuvattu materiaalit ja menetelmät. Käyttämällä tätä strategiaa, seuraavat ehdokas markkereita kaupallisesti saatavilla ELISA tai muun julkistetun määritykset valittiin testattavaksi: MSLN, WFDC2, IGF2, CHI3L1, MMP7, BMP7, LCN2, TACSTD1. Monet näistä merkeistä on aiemmin raportoitu olevan koholla naisten munasarjasyövän [11] – [22]. Useat muut ehdokas merkkiaineita tutkittiin myös perustuvat kirjallisuuteen ja /tai yhteistyömahdollisuuksia: MUC16, IL13RA2, PRL, MIF, SPP1 ja AMH [8], [23] – [25].

arviointi yksittäisiä merkintöjä

optimoimiseksi analyysi merkki yhdistelmiä, arvioimme kunkin ehdokkaan markkeri yhteistä sarjaa hyvin selityksin EOC tapauksissa ja kontrolliseerumin näytteitä, mukaan lukien naisten terveitä munasarjat, sekä naisten munasarjojen hyvän- ja pahanlaatuisten olosuhteissa. 14 ehdokasta merkkiaineita EOC edellä kuvatut arvioitiin vaiheittain käyttäen kolmea päällekkäistä seerumia sarjaa yhä monimutkaisempia: Suodattaminen set, Mini-Triage set, ja Triage asetettu (taulukko 1). Koostumus kukin seerumin sarjaa osalta vaiheessa ja kasvainhistologiaa kuvataan taulukossa 2.

Ensimmäinen askel ehdokas merkki arviointi oli suodatus joukko sera, sarja seoksia eri suhteissa yhdistettyjen EOC seerumeista EOC potilaiden ja kontrolliseerumin ryhmiin vapaaehtoisia, jotka eivät ole EOC. Tämä testi toimi ensimmäinen leikkaus poistaa määrityksiä, jotka eivät osoittaneet johdonmukaista eroa tapausten ja kontrollien minimaalisella käytön tapauksessa ja valvonnan näytteitä. Tämä suodatin oli lähinnä sisäsyntyinen standardikäyrä; jättäminen osoittaa lineaarista suhdetta tapauksessa valvoa suhde ja ELISA-signaali osoitti, että joko markkeri tasot olivat suunnilleen samat useimmiten kontrolleilla tai että määritys ei ollut riittävän herkkä havaitsemaan pieni lisäys (tai vähennys) merkki tasoilla tapauksissa. Kahdeksan 11 ehdokkaan markkereita testataan suodatuksen set osoittivat lineaarista suhdetta suhdetta EOC Potilasseerumin valvoa seerumin näytteissä ja signaali mitattiin vastaavien ELISA-määrityksessä, kun taas kolme ehdokasta markkereita (TACSTD1, AMH, IL13RA2 ) ei osoittanut johdonmukaista suhdetta näiden arvojen ja ei arvioitu tarkemmin.

kahdeksan markkereita, jotka läpäisivät analyysi suodatus asetettu, sekä kaksi aikaisemmin validoitu EOC markkereita (MUC16 ja MSLN [17], [26] ), testattiin edelleen Mini-Triage seerumin sarja (n = 71). Neljä markkereita (PRL, SPP1, BMP7, LCN2) osoitti heikko suorituskyky (herkkyys 10% 98%: n spesifisyys ja ala (AUC) 0,70) Mini-Triage set ja ei jatkettu. Loput kuusi ehdokasta markkereita, kuten aikaisemmin validoitu EOC merkki WFDC2 [12], [27], testattiin suurempi Triage seerumin sarja (n = 214). Tussit testattu Laajennetun aineisto arvioitiin useiden kriteerien, kuten herkkyys 98% tarkkuus, AUC ja keskimääräinen normalisoitu seerumimarkkerin tasoilla tiettyjä osia tapausten ja kontrollien (taulukko 3). Tunnetut markkereita MUC16, WFDC2 ja MSLN osoitti parhaan suorituskyvyn mukaan 98%: n spesifisyys kaikissa tapauksissa verrattuna kaikki säätimet, jossa herkkyydet 70%, 61%, ja 30%: lla. Nämä kolme merkkiä osoittivat myös parhaan suorituskyvyn, kun vain tapauksia vakavien histologia katsottiin (herkkyydet 98% spesifisyys 86%, 75%, ja 45%, tässä järjestyksessä). Kunkin merkki, myös laskettuna välisen etäisyyden EOC potilaiden ja terveiden verrokkien (naiset ilmoittautunut mahdollisille seulonta tutkimuksissa, jotka pysyivät ilmaiseksi munasarjasyövän vähintään kahden vuoden ajan seerumi kokoelma.) Normalisoimalla kaikki mittaukset keskimääräistä tasoa näissä terveitä yksilöitä (katso Statistical Methods). Tämän normalisointi, keskimääräinen taso keskuudessa tapauksessa ryhmä edusti ”syrjivä etäisyys” toimenpide, joka heijastuu kuinka pitkälle keskimääräisestä tapauksesta oli keskimääräisestä terveillä verrokeilla. MUC16 ja WFDC2 olivat selvästi parempia mukaan tämä metrinen, jolloin keskimääräinen normalisoitu seerumimarkkerin pitoisuudet tapauksissa (suhteessa terveisiin kontrolleihin) 6,7 ja 10,0, vastaavasti. Vertailun muiden merkkiaineiden kaikki tekee vähemmän kuin 2,5 (kuvio 1 ja taulukko 3).

Bar korkeudet osoittavat keskiarvon normalisoidut arvot tietyn markkerin määritetyn tapausten alaryhmää tai valvontaa. Virhepalkit edustavat 95%: n luottamusväli liittyy keskiarvo. Logaritmin seerumimarkkerin pitoisuudet normalisoitiin standardipoikkeamat keskiarvosta vastaavan mittausten terveillä verrokeilla.

arviointi yhdistelmän merkkiaineiden

Seitsemälle markkereita arvioitiin triage asettaa testasimme kaikki merkkiaineiden yhdistelmät joko kaksi tai kolme, ja verrattiin yksilöille syövän kaikille munasarjasyöpä potilaiden tai vakavasta tapauksissa vain. Paras suoriutuneen kahden markkeriyhdistelmä joko analyysi oli MUC16 ja WFDC2 (taulukko 4). Tämä kahden markkeriyhdistelmä tuotti herkkyydet 98% spesifisyys 72% kaikissa tapauksissa ja 86% varten vakavien tapausten vain, verrattuna herkkyyksiä 98% spesifisyyttä MUC16 yksin 70% (kaikista tapauksista) ja 86% (vakavasta tapauksista). Kuitenkin suorituskyky paras kahden merkkiaineen yhdistelmä (MUC16 ja WFDC2) ei ollut merkittävästi erilainen kuin paras yksittäinen markkeri (MUC16) mitattuna pAUC (maasta spesifisyys = 100% ja spesifisyys = 90%) välillä paras yksittäinen merkki ja paras kahden merkkiaineen yhdistelmä. Arvio kaikkien mahdollisten kolmen merkki yhdistelmiä (tietoja ei esitetty) myöskään osoittanut mitään parannusta suorituskyvyssä kummassakaan herkkyys 98% spesifisyyttä tai AUC.

Suorituskyky arvioinnin yhteydessä histologinen tyyppi ja vaihe

tutkia, miten merkki suorituskyky vaihteli histologinen tyyppi ja vaihe, laskimme määrä ja prosenttiosuus tapauksista oikein luokiteltu MUC16 /WFDC2 yhdistelmä merkki histologisesti ja vaiheessa kaikissa tapauksissa verrattuna kaikkien hallintalaitteiden (Healthy Controls, kirurginen Benigns ja kirurgiset Normals see Kliiniset verinäytteitä) on Triage asettaa käyttäen 98%: n spesifisyys tämän yhdistelmän merkki. Suorituskyky MUC16 /WFDC2 yhdistelmä merkki selvästi vaihteli munasarjasyöpä histologia: prosenttiosuus tapauksista luokiteltu oikein oli 86% (38/44) ja vakavien tapauksissa 83% (5/6) ja endomet- tapauksissa 17% (1 /6) mucinous tapauksissa ja 0% (0/5) selkeitä solun tapauksessa (taulukko 5). Muita markkereita käytetään joko yksinään, pareittain tai kolmen, osoitti samoin huono suorituskyky selkeä solujen ja mucinous tapauksissa (tietoja ei esitetty).

Marker suorituskyky esiintyi myös vaihtelevan vaiheeseen-the MUC16 /WFDC2 yhdistelmä merkki tunnistettu oikein 39% (9/23) vaiheen I tapauksissa 75% (3/4) vaiheen II tapauksista, 87% (34/39) vaiheen III tapauksissa ja 100% (5/5) ja vaihe IV. Kuitenkin, nämä tulokset sekoitti eri yhdistelmä histologialtaan koko vaiheissa. Vuonna Triage asetettu, suurin osa vaiheen III ja IV tapaukset olivat vakavien syöpiä (35/44), kun taas suurin osa vaiheen I ja II tapaukset olivat ei-vakavien syöpiä (endomet-, mucinous, kirkas solu ja muut) (18/27 ). Tämä näyte kokoonpano johtui siitä, että serous syövät ovat todennäköisemmin tunnistaa myöhäisessä vaiheessa, kun taas päinvastainen pätee endomet-, selkeitä solun ja mucinous syöpiä.

Keskustelu

arvioitiin 14 ehdokas varhainen havaitseminen merkkiaineita EOC käyttämällä kolmea päällekkäistä sarjaa seeruminäytteitä kerätään naisia, joilla on kliinisesti diagnosoitu EOC ja syöpää vapaa naisten kanssa ja ilman gynekologisia sairauksia. Markkereita arvioitiin peräkkäin suurempia seerumin sarjaa riippuen niiden suorituskyky edellisessä vaiheessa. Sillä markkereita, jotka valmistui suurin vedostulostus, arvioimme, miten kukin merkki erikseen ja kahden tai kolmen niiden kyky havaita kliinisesti diagnosoitu munasarjasyöpä.

kolme määritykset (TACSTD1, AMH, IL13RA2) ei tunnistanut vastaavan markkeri seerumiseos peräisin EOC tapauksissa tai yhdistettyä kontrolliseerumeiden. Nämä tulokset viittaavat siihen, että jos on olemassa ero tapausten ja kontrollien välillä näiden merkkiaineiden on oltava hyvin pieni, ja meidän olisi herkempi määritys havaita eroa. Neljä merkkiä: PRL, SPP1, BMP7 ja LCN2, läpäisi suodatus sarja (altaat tapauksista ja tarkastukset), mutta oli huono herkkyys ja spesifisyys kun arvioidaan yksittäistapauksessa ja ohjaus yksilöitä. Toinen arviointi PRL Seerumin joukko sisältää enemmän kirurginen valvonta paljasti, että seerumin PRL tasot liittyivät verenkeräyslaitteen ehtoja sijasta tautitilan [28]. Nämä havainnot korostettaisiin hyvin kontrolloituja ja hyvin dokumentoitu keruu, ja huolellinen valinta valvontaa, kuten jotkut ryhmät raportoivat edelleen, että prolaktiini on käyttökelpoinen markkeri munasarjasyövän ilman riittävää huomiota yhteensopivuuden valvonnan [29].

Huomasimme, että markkeritasoihin vaihdellut huomattavasti histologisia tyyppejä ja kliininen vaiheissa munasarjasyöpä. Kaikki merkkiaineiden ja yhdistelmät tässä analyysissä oli korkeampi herkkyys 98% tarkkuus, kun vain vakavien EOC tapauksissa katsottiin, verrattuna kaikissa tapauksissa EOC. Tämä ero vaikutti olevan heikon suorituskyvyn meidän ehdokas merkkiaineiden selkeä solujen ja mucinous tapauksissa. Mitä herkkyys on 98% tarkkuus, parhaiten toimiviin markkereita havaitsemiseksi kliinisesti ilmeinen vakavien EOC olivat MUC16, WFDC2 ja MSLN, jossa herkkyydet 98% spesifisyys 86%, 75%, ja 45%, vastaavasti, Triage asettaa seeruminäytteitä. Ei markkereiden yhdistelmää tarjotaan huomattavasti parempi herkkyys 98% spesifisyys kuin paras yksittäinen merkki, MUC16, erottamisessa kaikki munasarjasyöpiä tai vakavasta munasarjojen syöpiä kontrolleihin. Korkea positiivinen korrelaatio (alue: 0,54-0,75) joukossa kolmen parhaan yksittäisen markkereita osaltaan puute merkittävää parannusta herkkyys yhdistettäessä merkkiaineita tässä tutkimuksessa.

tietojen analysointi lähestymistapa poikkesivat useimmissa edellisessä tutkimuksissa useita merkittäviä tavoilla. Ensin ositettu tuloksemme mukaan histologinen tyyppi, jossa painotetaan vakavasta EOC. Munasarjasyöpiä eri histologisia tyyppejä hyvin tiedossa on hyvin erilaisia ​​kliinisiä ja molekyylitason ominaisuuksia, mutta ne ovat usein virheellisesti ryhmitelty analyyseissä Merkittyjen suorituskykyä, oletettavasti vuoksi suurempi otoskoko. Olemme keskittäneet analyysejä vakavasta alatyyppi EOC koska varhainen havaitseminen korkealaatuisesta serous syöpien on suurimmat mahdollisuudet pelastaa ihmishenkiä. Päätös ositusta tukivat meidän havainto, että markkereita tutkittu tässä johdonmukaisesti paremmin kuin vakavasta ja endomet- tapauksia kuin selkeä solujen ja mucinous tapauksissa (jopa vaihe I tapauksissa vain), ja että näin ollen merkki suorituskyky oli alhaisempi yhdistetyssä asiassa asettaa kuin vakavien tapaukset. Toiseksi, valitsimme ei ositusta analyysimme mukaan sairauden vaiheessa, koska emme ole varmoja, että kliinisen vaiheen I /II korkealaatuista serous syöpä on käyttökelpoinen malli kliinisesti okkultismin esiasteita tappava munasarjasyöpiä jotka ovat todellisia tavoitteita varhaisen havaitsemisen . Lisäksi jakelu histologialtaan vaihteli vaiheessa sekoittavat tulkinta vaiheen erityisiä tuloksia. Kolmanneksi päätimme käyttää epätavanomaisia ​​toimenpiteitä merkki suorituskykyä. Alhainen esiintyvyys EOC edellyttää erittäin spesifinen markkeri vähentää väärien hälytysten määrää terveillä naisilla, jotta vältetään tarpeetonta kärsimystä, diagnostinen seuranta ja leikkaus. Sitä vastoin tavanomaiset AUC analyysi umpimähkäisesti tiivistää suorituskykyä merkki kaikilla tasoilla erityisyyttä. Vaikka olemme sisällyttäneet AUC-arvot tässä raportissa, pidämme herkkyys määrityksessä on 98%: n spesifisyys olla enemmän merkittävä toimenpide sen suorituskykyä. Myönnämme kuitenkin, että vaikka superlatiivi herkkyys, 98% tarkkuus ei vieläkään riitä varhaisen havaitsemisen testi normaalissa riskin väestöä.

Lopuksi mukana mitta suuruuden eroa signaalin välillä EOC potilaiden ja ilmeisesti terveillä vapaaehtoisilla. Uskomme, että tämä tieto on hyödyllinen auttamaan ennustaa arvon markkeri varhaisen havaitsemisen käytettäessä kliinisesti havaittu tapauksiin, koska korkea signaali aikaan oireet voivat olla sopusoinnussa havaittavissa signaali aiemmin taudin kulun, kun kasvain taakka on pienempi ja signaali on oletettavasti pienempi. MUC16 ja WFDC2 olivat ainoat markkereita, jotka osoittivat suuria nousuja tapauksissa suhteessa terveisiin kontrolleihin (6,7 ja 10,0 syrjivä etäisyyden yksikköä, tässä järjestyksessä). Markkereita, joilla on sama herkkyys ja spesifisyys voi olla hyvin erilaisia ​​syrjiviä etäisyyden toimenpiteitä, ja ne, joilla on suurempi etäisyys voi olla parempia ehdokkaita varhaiseen havaitsemiseen sovelluksissa, koska on mahdollista säilyttää niiden suorituskyky paremmin pienemmillä kasvaintaakat kuin markkeritasoihin vaimentavat kohti valvonnan tasoa.

tärkeä tekijä harkita tulkinnassa tuloksemme ja muilla vastaavilla suunniteltu tutkimuksissa on, että nämä merkkiaineet arvioitiin perustuen niiden kykyyn erottaa seerumin yksilöitä naisilla, joilla oli kliinisesti ilmeinen munasarjasyöpä. On erittäin tärkeää pitää mielessä, että arvon markkeri varhaisen havaitsemisen määräytyy sen kyky havaita munasarjasyöpä ennen kehittämistä kliinisiä merkkejä tai oireita (ja lisäksi ennen etenemistä edennyt pitkälle). Siten kunnes suorituskyky ehdokas merkki arvioidaan näytteet naisilta, joilla on oireeton, varhaisessa vaiheessa syöpä, sen arvo varhaishavaintojärjestelmä merkkiaine on hypoteettinen, ja tutkijoiden on oltava varovainen, ettei liioitella saataviaan kun määrityksiä testattu vain näytteistä naisilta, joilla on kliinisesti havaittavissa taudin [29]. Lisäksi suhde merkki suorituskykyä kerätyistä näytteistä diagnoosia tehtäessä suorituskyvyn aikana avautuu mahdollisuus varhaiseen havaitsemiseen ei ole hyvin ymmärretty, ja ne voivat vaihdella huomattavasti eri merkkiaineita.

Tässä esitetyt tulokset ovat rohkaisevia, mutta paljon työtä on tehtävä ennen kuin tiedämme, olemmeko kantaman tehokas varhaisen havaitsemisen testi EOC. Erityisesti on välttämätöntä arvioida merkkiaineiden seeruminäytteistä saatu ennen taudin havaitsemista, näytteissä naisilta, joilla on kliinisesti piilevä, lokalisoitu serous syöpiä. Kerätyt näytteet ennen taudin diagnosointiin ovat rajallinen ja arvokas luonnonvara, ja näytteitä naisten aavistamaton, piilevä, paikallinen syöpiä (esim löysi vaarassa vähentää salpingo munasarjan poisto) ovat vieläkin arvokkaampia, joten huolellinen valinta merkkien arvoinen arvioinnin nämä näytteet on kriittinen. Koska epävarma suhde merkki suorituskykyä ennen diagnoosia ja suorituskykyä tai diagnoosin jälkeen munasarjasyöpä, uskomme, että markkereita, jotka osoittavat riittävän suorituskyvyn erikseen mutta eivät täydentää MUC16 kliinisessä (at-diagnoosi) näytteitä ei pitäisi sulkea pois lisäarviointia. Sen vuoksi aiomme jatkaa arviointia MUC16, WFDC2, MSLN ja MMP7, joilla kaikilla on herkkyys 30% 98% spesifisyyden havaitsemiseen kliinisesti ilmeinen vakavien syöpiä, jotka alkavat analyysi seerumin kerätyt näytteet kuukausia tai vuosia ennen diagnoosia of vakavien munasarjojen syöpien.

Tulevaisuudessa kohti varhainen havaitseminen vakavien munasarjasyöpä voivat hyötyä myös laajennettu löytö ponnisteluja. Viimeaikaiset tutkimukset varhaisista luonnon historiasta EOC mukaan joissakin tapauksissa vakavien EOC voivat olla peräisin munanjohtimet (FT). Naisilla, joilla on ituradan mutaatio BRCA1 tai BRCA2, piilevä maligniteetin vakavien histologia, intraepiteliaalisten karsinooma tai dysplasia löydetään usein Fimbriaproteiinia lopussa FT aikaan profylaktisen leikkaus [30], [31]. Itse asiassa, profylaktinen poisto munanjohtimen ja munasarjat naisilla geneettisesti suuri riski EOC on osoittautunut strategia vähentää kuolleisuutta munasarjasyöpä. Vuonna Näiden havaintojen perusteella, se voi olla hyödyllistä tarkastella geenien suuressa määrin ja spesifisesti ilmaistu varhaisessa vaiheessa vakavien munanjohdin syöpiä mahdollisina merkkiaineiden vakavien ”munasarjasyövän” syöpä (kun taas edellinen keskityttiin myöhäisessä vaiheessa munasarjojen kasvaimia). Lisäksi kehitys proteomic tekniikat ovat mahdollistaneet tehdä perusteellinen profilointi seerumin proteiineja, jotka sovellettuina ennalta diagnostisia näytteitä voisi osoittautua tehokkaaksi keinoksi yksilöidä asiaa markkereita. Jatkuvia ponnisteluja kohdistamalla löytö, harkittuja yhdistelmä markkereita, ja kerrostuminen seulonta -populaatioihin syöpäriski voi vielä johtaa tehokkaaseen varhaisen havaitsemisen testi munasarjasyöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Marker valinta

päämääränä merkki valinta oli tunnistaa geenit, joiden proteiini tuotteet ovat yhdenmukaisesti löytyy korkeammilla tasoilla veressä varhaisvaiheen potilaiden vakavien munasarjasyöpään kuin terveillä henkilöillä. Meidän yleinen strategia tämän tavoitteen saavuttamiseksi oli tunnistaa geenejä, jotka olivat erittäin ilmaistaan ​​serous munasarjasyöpiä mutta minimaalisesti ilmaistu useimmissa normaaleissa kudoksissa. Olemme lisäksi suositaan geenejä, joiden tiedettiin koodaavat eritettyjä proteiineja. Geeni ekspressiotietojen käyttää arvioimaan geeniekspression munasarjakasvaimia sisältyvät cDNA microarray profiilit 72 munasarjakasvainten, joista suurin osa oli myöhään kasvaimet vakavien histologia (käsikirjoitus valmisteilla). Tiedot geenien ilmentymisen (mikä heijastuu mRNA tasot) normaaleissa kudoksissa saatiin julkaistusta tutkimuksen 115 ihmisen kudosnäytteiden edustavat 35 eri kudosten tyyppejä, käyttäen cDNA mikrosiruja, jotka edustavat noin 26000 eri ihmisen geenejä [32]. Näiden kriteerien perusteella, seuraavat ehdokas markkereita saatavissa seerumin määrityksiä valittiin testattavaksi: WFDC2, MSLN, IGF2, CHI3L1, MMP7, BMP7, LCN2, TACSTD1. Useita muita markkereita testattiin myös perustuvat kirjallisuuteen ja /tai yhteistyömahdollisuuksia: MUC16, IL13RA2, PRL, MIF, SPP1 ja AMH [8], [23] – [25].

Kliininen verinäytteitä

Koehenkilöt rekrytoitiin välillä 01 kesäkuu 1998 ja 01 heinäkuu 2002 tukemaan protokollia Tyynenmeren Munasarjojen Cancer Research Consortium (POCRC) lääkärit Pacific Gynecology Specialists, Swedish Medical Center, Providence Medical Center, University of Washington /Seattle Cancer Care Alliance, ja Virginia Mason Medical Center. Tapauksia määritelty olevan invasiivisen epiteelikarsinooman vahvistanut standardoitu tarkastelu potilastiedot ja patologi tarkastelua parafinoidut kudosta kasvainhistologiaa. FIGO vaiheessa ja histologia tapauksista on koottu taulukkoon 2. Veri saatiin myös kolme valvontaluokkaa: i) ”Terveet verrokit” -apparently terveillä naisilla kirjoilla mahdollisille seulonta tutkimuksissa, jotka pysyivät ilmaiseksi munasarjasyövän vähintään kahden vuoden ajan seerumin keräys; ii) ”Surgical Benigns” -naisten kirurgisesti vahvistettu hyvänlaatuinen munasarjojen patologia ii) ”Surgical Normaali” -naisten että leikkauksessa mutta munasarjavastetta patologiaa tunnistettiin (taulukko 1). Kukin potilas toimitti kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ja potilastiedot julkaisu hyväksymässä muodossa FHCRC Institutional Review Board (IR tiedosto numero # 4771). Kirurgisista näytteistä saatiin ennen mitään hoitoa tai leikkausta (mutta antamisen jälkeen anestesian). Kaikki näytteet nimettömiksi potilaan luottamuksellisuuden.

Verta otettiin kolmeen tai neljään 10,0 ml SST (seerumin erotin) Vacutainer veriputkea (Fisher Scientific Cat. # 02-683-98, Mfg. No .: 367985 ) sekä yksi laventeli-top EDTA Vacutainer verinäytteen putki (Fisher Scientific Cat. # 02-657-32). Veri käsiteltiin ja laitettiin pakastimeen 4 tunnin kuluessa keräämisestä ajan. Kaikki putket sentrifugoitiin tasapainoisesti sentrifugoitiin 1200 x g 10 minuuttia erillisten seerumia solu- komponenteista solujen erottamiseksi nesteestä. Seerumin SST putket ja plasmaa EDTA- jaettiin osiin mikrosentrifugiputkiin 1 ml per näyte ja säilytettiin -80 ° C: ssa. Kaikki markkereita arvioitiin seerumin lukuun ottamatta SPP1 (osteopontiinin), joka arvioitiin käyttämällä EDTA plasmassa valmistajan ohjeiden (katso taulukko 6).

Merkit arvioitiin käyttämällä kolmea päällekkäistä verinäytteitä,