Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Sytokiinit ja kemokiinit kasvaimen mikroympäristössä ajaa metastaattisen kehittymisestä ja seerumin voisi peilata meneillään tulehdusreaktiota syöpäkasvaimen kohdalle. Uudenlaisten erittäin herkkiä välineitä tarvitaan tunnistamaan peräsuolen syövän potilaiden riski on suuri toistuminen, joka olisi paremmin seurata tarkasti leikkauksen jälkeinen seuranta. Tässä me tutkimme, onko kiertävien tulehdusmarkkereiden voidaan käyttää ennustamaan uusiutumisen CRC potilailla.

Methods

Kiertävä tasoilla tulehduksellisten sytokiinien IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha, CCL2, CXCL8, VEGF ja akuutin vaiheen proteiini pentraksiini-3 mitattiin ELISA: lla ennen leikkausta seeruminäytteistä takautuvasti kerättiin kohortin kuusikymmentäyhdeksän potilailla, joille tehdään kirurginen resektio vaiheessa 0-IV CRC ja liittyy leikkauksen jälkeinen tauti uusiutuu.

tulokset

Cox monimuuttuja-analyysi osoitti, että yhdistetty korkeita (≥ROC cut off-arvo) on CXCL8, VEGF ja Pentraxin3 liittyi suurentunut riski taudin uusiutumisen [HR: 14.28; 95% CI: (3,13-65,1)] riippumatta TNM lavastus. Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että CXCL8, VEGF ja Pentraxin3 tasot olivat merkitsevästi yhteydessä elinajan (P 0,001).

Johtopäätökset

Kiertävä tulehdusvälittäjiä tehokkaasti ennustaa leikkauksen jälkeisiä uusiutumisen jälkeen CRC leikkauksen. Siksi tämä tutkimus viittaa siihen, että niiden validointi suurissa kliinisissä tutkimuksissa, saattaa auttaa räätälöimään CRC leikkauksen jälkeinen hallinta.

Citation: Di Caro G, Carvello M, Pesce S, Erreni M, Marchesi F Todoric J , et ai. (2016) Circulating tulehdusvälittäjiä mahdollisina Prognostic merkkiaineet Human peräsuolen syövän. PLoS ONE 11 (2): e0148186. doi: 10,1371 /journal.pone.0148186

Editor: Ken-ichi Mukaisho, Shiga University of Medical Science, Japani

vastaanotettu: 21 syyskuu 2015; Hyväksytty: 14 tammikuu 2016; Julkaistu: 09 helmikuu 2016

Copyright: © 2016 Di Caro et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi- ja sen tukeminen Tietopaketti.

Rahoitus: tuettiin 16230 Associazione Italiana per la ricerca sul cancro GDC. Rahoittaja ei ollut roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä (CRC) on johtava syy syövän kuolemaan kehittyneissä maissa [1]. Huolimatta edistysaskeleet diagnostisia testejä ja kirurgisia toimenpiteitä, jotka yleensä parantava tarkoitus, noin puolet potilaista, joille tehdään leikkaus CRC parantava tarkoitus kokee metachronous etäpesäke ja seurauksena kuolema [2]. Tähän mennessä patologinen solmukohtien Etäpesäke Kasvaimen System (TNM) lavastus pysyy vertailukohtana ennustamiseen CRC potilaalla kokevat sairauden etenemistä, vaikka ydin alkuperäisen Dukes [3] on olennaisesti muuttumattomana. Itse asiassa, histopatologiset lavastus puuttuu tarkkuus ja tärkeä osuus potilaista suurin riski taudin uusiutumisen eivät vieläkään havaita tämän menetelmän [2] [4]. Novel prognostisia biomarkkerit CRC mahdollistaisi tunnistamisen alaryhmässä potilaita, joilla on suuri riski kasvaimen uusiutumisen että olisi harkittava usein valvontaan, diagnostiikkaan seulonta ja terapeuttisesta.

On hyvin tunnettua, että tulehdussolujen kasvaimen mikroympäristössä vapauttavat tulehduksen välittäjäaineita, jotka puolestaan ​​aktivoivat paikallisia immuuni verkkojen edistää kehitystä ja pahanlaatuisten solujen kasvuun lisäämällä niiden leviäminen ja selviytymistä sekä angiogeneesiä [5] [6] [7-9]. Lisäksi tulehduksen välittäjäaineita, eli kemokiinit ja angiogeenisten tekijöiden on laukaista kehittämiseksi invasiivisen kykyjä, koska ne lisäävät kasvainsoluja liikkuvuutta ja maahanmuuttoa, että lopulta johtaa metastaattisen esiintyminen [8]. Yhteenliittäminen tulehduksen ja angiogeneesin selittyy kyky VEGF ja kemokiinin kuten CCL2 ja CXCL8 rekrytoida valkosoluja kasvain sivusto, joka puolestaan ​​tuottaa VEGF ja tulehduksellisten välittäjäaineiden ja siten täydentää tuumorigeenisia signaali kautta autokriini ja paracrine silmukka [8]. Kemokiinit ja sytokiinit ovat laajasti tuotetaan kasvain mikroympäris- riippumatta alkuperäisestä laukaisee [8] ja välittäjäaineiden, kuten IL-1b, TNFa ja IL-6 suoraan edistänyt syövän etenemisen kokeellisissa malleissa paksusuolen syövän [8, 10].

tulehdusvälittäjiä havaittu seerumissa potilailla saattaa peili meneillään oleva tulehdusreaktio on kasvaimen. Johdonmukaisesti, väestöpohjainen tutkimukset osoittivat, että henkilöt, joilla on korkea verenkierrossa tulehduksellisten välittäjäaineiden on suurempi riski kehittää CRC [11] [12, 13]. Siten seerumin näistä merkeistä on potentiaalia tulla paradigma ei-invasiivisia diagnostisia testejä havaitsemiseksi CRC potilaista [14]. Kuitenkin vain harvat tutkimukset tässä asiassa arvioitu kyky kiertävien tulehduksen välittäjäaineiden tunnistaa potilaat, jotka kehittävät postsurgical toistuminen ja metachronous etäpesäkkeitä suhteen nykyisen kliinisen prognostisia työkaluja CRC [15-17]. Siksi hyvin suunniteltu mahdollisille tutkimuksia tarvitaan paremmin vahvistaa niiden kliinistä merkitystä.

Tässä tutkimuksessa olemme takautuvasti näytteitä ennen leikkausta plasmasta CRC potilaalla, joille leikkaushoitoa meidän Institution ja me arvioi tasoa sytokiinien ja kemokiinien edustettuina IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha CCL2, CXCL8, VEGF ja akuutin vaiheen proteiini pentraksiini-3 saattaa liittyä postoperatiivisen sairauden uusiutumisen 5 vuoden seurantatutkimuksessa.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaan ilmoittautuminen ja tutkimuksen suunnittelu

69 potilasta, joilla oli diagnosoitu peräsuolen kasvain, ja peräkkäin jalostustoiminto radikaali leikkaus Humanitas Research sairaalassa parantava tarkoitus huhti 2008 ja elokuun 2009 on sisällytetty tässä tutkimuksessa. Kun potilaan antoi tietoisen suostumuksensa tutkimuksen verinäyte jokaisesta potilaan vedettiin aikaan sairaalaan ja ennen leikkausta voidaan käsitellä Plasmaerotusmenetelmää. Tutkijat, jotka sokaisi tuloksiin tasojen immuuni parametrien koottu kliininen tietokanta keräämällä potilaiden väestötiedot, kliiniset ja histopatologiset tiedot, jotka on tallennettu sen institutionaalisten intranetissä palvelimelle. Kasvain kliinisiä ja histopatologisia lavastus diagnoosin määritettiin kaikilla potilailla yhdistämällä histopatologiset löydökset kirurginen kirjaa ja leikkauksiin kuvantaminen. Tuumorin luokitus luokiteltiin mukaan American sekakomitean Cancer AJCC suuntaviivoja. Kaikki potilaan demografiset, kliininen ja histopatologiset muuttujat testattiin kovarianssi tasoilla immuunivälittäjäaineiden (taulukko 1). Nämä muuttujat, sekä määrä IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha, CCL2, CXCL8, VEGF: n ja akuutin vaiheen proteiini pentraksiini-3, testattiin ennustajina potilaan lopputulokseen, arvioida todennäköisyyttä kasvaimen pahenemisvai- suhteen siinä määrin, veren immuunivälittäjäaineiden. Me määritelty tulos CRC potilaiden muuttujana lukien tapauksessa (n = 9) paikallisen kasvaimen uusiutumista (n = 1) tai metachronous kaukaisilla elin etäpesäkkeitä (n = 8), joka on nimetty tauti elinaika (DFS). Selviytymisen potilaiden laskettiin tautikohtaisia ​​eloonjäämisen (DSS) ja asianomaisten mitään kuolemaa koskevat vain CRC tauti (n = 5). Havaita tai jättää pois postsurgical kasvain toistuminen, potilaalle tehtiin thoraco-vatsan tietokonetomografia-tomografia, vatsan ultraääni, ja rintakehän radiografia jotka tehtiin artikkelin yleisiä protokollia valvontaan. Seurantajakso alkoi heti kirurgisen ja havaitsemiseksi kasvaimen uusiutumisen tai kasvaimeen liittyvä kuolema laskettiin diagnoosista kunnes tiedot sensuroitiin. Keskimääräinen seuranta-aika kohortin tutkittu oli 56,33 kuukausi (SD = 15,74 kuukautta). Jos kuolema tapahtuma oli liity CRC sairaus, aika seuranta lopetettiin aikaan potilaan kuolemaan jota ei ole pidetty tapahtuma tuloksiin. Postsurgical kasvain valvonta seurata tietoja ei ollut saatavilla 6 ulos 69 potilaalla (8,7%) otettiin tutkimukseen ja jätettiin tämän vuoksi pois tuloksesta analyysin mukaan aiempien ohjeiden [18]. Eettinen komitea Humanitas Clinical ja tutkimuskeskus hyväksyi tutkimuksen ja lähettävän lääkärin saatu kirjallinen suostumus jokaisesta potilaan ennen leikkausta.

Analyysit

Plasmanäytteitä sentrifugoitiin 3000 rpm: llä 10 minuutin ajan ja pidettiin sitten -80 ° C: ssa, kunnes ELISA arviointi. Plasman IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha, CCL2, CXCL8, VEGF määritettiin kaupallisesti saatavilla sandwich entsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA) mukainen pakkaus valmistajan ohjeiden mukaisesti. PTX3 plasmassa määritettiin kanssa ”in house” sandwich-ELISA, joka perustuu monoklonaalinen vasta-aine MNB4 (capture-vasta-aine) ja kanin anti-seerumia (tunnistus vasta-aine), kuten aiemmin on kuvattu [19]. Toteamisraja on 100 pg /ml ja interassay vaihtelu on 8% -10%. Normaaliarvot PTX3 ovat 2 ng /ml. Immuunijärjestelmän välittäjien tasot potilaiden plasmanäytteistä määritettiin vertaamalla kunkin arvon kaksoiskappaleet standardikäyrän, joka perustuu 2-kertainen sarjalaimennos rekombinantti-IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha, CCL2, CXCL8, VEGF: n ja PTX3 pitoisuus on tunnettu.

tilastollinen

tilastollinen analyysi suoritettiin käyttäen Epi Info (Version 3.4.3), StatsDirect tilastollinen ohjelmisto (versio 2.5) ja GraphPad Prism-ohjelmiston (versio 4.1). Yhdistyksen välillä immuunijärjestelmän sovittelija arvojen ja potilaan lähtökohta demografiset, kliiniset ja histopatologiset ominaisuudet sekä kasvaimen ominaisuuksista arvioitiin lineaariregressioanalyysillä. Parhaiten selvittää yhdistyksen kunkin immuuni välittäjänä ja potilaan ennustetta, vastaanottimen toiminnallinen käyrä (ROC) analyysi. ROC raja-arvo kunkin jatkuvan jakelun määriteltiin ennustaa esiintyminen potilaan pahenemisvaiheita. Coxin suhteellisen riskin malliin kehitettiin arvioimaan ROC raja-arvo IL-1, IL-6, IL-10, TNFalpha CCL2, CXCL8, VEGF ja PTX3 ja muut demografiset, kliiniset ja histopatologiset ominaisuudet, ennustettaessa esiintyminen DFS. Teiksi sekoittavat tekijät, Cox monimuuttuja-analyysi suoritettiin syöttämällä kaikki muuttujat, joiden P-arvo on alle 0,20 klo univariate analyysi. By taaksepäin vaiheittaista poistamista lähestymistapa, ei-muuttujat ja niiden ei-merkittäviä yhteisvaikutuksia, poistettiin mallista. Kaplan-Meyer käyrät DSS tulostettiin, kun taas log-rank-testi käytettiin vertaamaan käyrät kunkin alaryhmän CRC potilaista. Kutakin testiä vain kaksipuolinen P-arvot ovat alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Yleisötiedot ja histopatologiset ominaisuudet CRC potilaiden mukana tässä tutkimuksessa ja niiden vastaavuus määrällinen arviointi ennen leikkausta plasma-arvot immuunivälittäjäaineiden on esitetty taulukossa 1. alaryhmän analyysi osoitti, että kaikista niistä immuunivälittäjäaineiden vain IL-1 b: n ja VEGF-arvot lisääntyi hieman pitkälle TNM pysähdyspaikan (P = 0,06 ja P = 0,04, vastaavasti) (taulukko 1). Kiinnostavaa kyllä, ainoastaan ​​IL-1b ja TNFa-arvot nousivat potilailla, joilla on korkea CEA veressä (≥5ng /ml) cut-off yleensä käytetään tähän biomarker, kun taas muut immuunivälittäjäaineiden eivät liittyneet CEA tasoilla (taulukko 1). Seuraavaksi testasimme korreloivat kertoimien joukossa jatkuva plasma-arvot tulehdus- markkereita, kuten on esitetty taulukossa 2. Lineaarinen regressioanalyysi osoitti, että IL-1 b korreloivat on suuressa määrin TNF-a (r = 0,94, P 0,001) riippumatta muista immuunivälittäjäaineiden (taulukko 2). Lisäksi, CXCL8 arvot itsenäisesti korreloi lineaarisesti kuin IL-6, CCL2: n ja VEGF (r = 0,34, P = 0,006; r = 0,31 p = 0,01; r = 0,36 p = 0,003), kun taas IL-10-arvot lineaarisesti korreloivat vain sellaisia ​​VEGF (r = 0,39, P 0,001), toisistaan ​​riippumatta, immuunijärjestelmän markkereita (taulukko 1). Mielenkiintoista, akuutin vaiheen proteiini PTX3 tasot eivät korreloineet minkään immuunijärjestelmän markkereita tutkittu (taulukko 1), mikä viittaa siihen, että PTX3 saattaisivat noudattaa erilaisia ​​polkuja aktivaation CRC potilaista verrattuna muihin immuunivälittäjäaineiden.

myöhemmin olemme tutkineet yhteys perustason (ennen leikkausta) pitoisuuksia plasmassa immuunivälittäjäaineiden ja riski kehittää postsurgical CRC toistuminen. Jatkuva jakamiin potilaan plasman kiertävien tulehduksen välittäjäaineita mukaan postsurgical CRC taudin uusiutumisen on esitetty kuvassa 1. Huomasimme, että potilailla, jotka eivät uusiutunut (n = 54) oli huomattavasti pienempi plasman IL-1 (P = 0,008), IL-6 (P = 0,01), IL-10 (P = 0,04), CXCL8 (P≤0.001), VEGF (P≤0.001) ja TNFalpha (P = 0,02) verrattuna niihin, jotka kokivat toistumisen CRC taudin (n = 9) (kuvio 1). Sen sijaan CCL2 arvot eivät muuttuneet mukaan ennuste CRC potilaiden ja akuutin vaiheen proteiini pentraksiini-3 oli vain noususuunnassa (P = 0,11) joukossa saaneista postsurgical tauti uusiutuu (kuvio 1).

määrä IL-1 (A), IL-6 (B), IL-10 (C), TNF-a (D), IL-8 (F), VEGF (G) lisäsi merkittävästi potilailla, jotka kokenut taudin uusiutumisen, kun taas akuutissa vaiheessa proteiini pentraksiini-3 (H) osoitti taipumusta liittää huonompi ennuste. CCL2 (E) tasot eivät liittyneet taudin uusiutumisen.

Yhdenmukainen aikaisempien tutkimusten [20], jotta saadaan toistettavia ja luotettava menetelmä benchmark ennustetekijöiden arvot biomarkkereiden, laskimme ROC käyrät kullekin immuuni merkkiaineita CRC potilailla, joilla oli hyvä ennuste (n = 54) verrattuna niihin, jotka kokivat taudin uusiutumisesta (n = 9) klo seuranta (S1 Kuva). ROC-käyrä malli analyysi paljasti tulehdusvälittäjiä paremmin herkkyys kuin spesifisyyden kuten IL-1b (0,88 ja 0,68), IL-6 (0,88 ja 0,59), IL-10 (1 ja 0,40), TNF-a (1 ja 0,05), CCL2 (0,77 ja 0,5), CXCL8 (1 ja 0,64) ja VEGF: (1 ja 0,66) optimaalisella cutoffs tunnistaa mallin (S1 kuvio), kun taas PTX-3 oli suurempi spesifisyys että herkkyys (0,55 ja 0,90) (S1 Kuva). Parantaa ymmärrystämme ennustetekijöiden merkitystä immuunivälittäjäaineiden, suunnittelimme Cox univariate ennustetekijöitä malli (taulukko 2), joka perustuu kynnysarvot tunnistetaan ROC käyrä kunkin tulehduksesta. Tässä mallissa, CRC potilailla, joilla oli korkeammat pitoisuudet plasmassa (≥ROC arvo) IL-1 (P = 0,01), CXCL8 (P 0,001), IL-10 (P = 0,01), PTX3 (P = 0,002), IL -6 (P = 0,06), ja VEGF: n (P 0,001), joka liittyy huonompi ennuste (taulukko 3), kun taas korkeammat tasot CCL2 (P = 0,31) ja TNF-a (P = 0,89) (taulukko 3) ei ole. Edelleen, me testattiin itsenäisyyttä näiden biomarkkereita. Välttämiseksi overfitting COX mallin [21, 22], koska suhteellisen pieni määrä tapahtumia (n = 9) meidän kohortin kukin tulehdusvälittäjäaineen oli erikseen merkitty Monimuuttuja malli myös TNM tai jonkin muun tulehdusvälittäjäaineen (data ei esitetty). Näissä malleissa huomasimme, että kaikkien tulehduksen välittäjäaineiden, jotka olivat merkitseviä yhden muuttujan analyysiin vain CXCL8 CCL2 ja VEGF arvot itsenäisesti ja merkittävästi liittyvät ennusteeseen (tuloksia ei ole esitetty). Yksityiskohtaisesti korkea CXCL8, VEGF ja PTX-3 (≥ROC arvo) tunnistettu alaryhmien CRC potilaista [44,4% (28/63); 42,8% (27/63); 15,8% (10/63), vastaavasti], että tehokkaasti havaittu taudin uusiutumista [47,3% (9/19); 50,0% (9/18); 50,0% (5/5)]. Niinpä näiden tulosten yhdistimme tasot CXCL8, VEGF: n ja PTX-3 (≥ROC arvo yhdistetty markkereita) (taulukko 4), ja säätää sekoittavat ja testata sen prognostinen itsenäisyys, teimme Cox Monimuuttuja-analyysissä, jossa suhteen väestötiedot, kliinisiä ja histopatologisia ominaisuuksia (taulukko 4). Cox monimuuttuja-analyysi osoitti, että korkeampi yhdistetyn CXCL8, VEGF ja PTX-3 (≥ROC arvot) liittyy huonompi ennuste [HR: 14,28, 95% CI (3,13-65,1), P 0,001] riippumatta TNM lavastus ja muiden muuttujien sisältyvät malliin (taulukko 4). Yhdistetty korkea katkeamisen CXCL8, VEGF ja PTX-3-arvojen esiintyi vain 11% (7/63) CRC potilaista, mutta tämä alaryhmä tehokkaasti tunnistaa 71,4% (5/7) relapsoivan tapauksista. Kääntäen, pieni leikkaus-off yhdistetyn tulehduksellisten arvojen CXCL8, VEGF ja PTX-3 tunnistanut 38% (24/63) CRC potilaalla on 0% (0/24) relapsoivan tapauksista. Kaiken ennustearvo havaitaan tauti toistuminen yhdistetyn pisteet CXCL8, VEGF ja PTX-3 oli parempi kuin jokaiselle niiden erilliset arvot (kaikki P≤0.05).

Kuva 2 esittää DSS käyrät kaikkien tutkittujen potilaiden Sub ryhmitelty plasman arvot CXCL8, VEGF, PTX-3 (≥ROC arvot) ja immuunijärjestelmän pisteet. Löysimme yhteydessä elinajan keskuudessa CRC potilailla, joilla on arvot CXCL8 (P = 0,008), VEGF (P = 0,001), PTX-3 (P = 0,005) yläpuolella ROC kynnys (≥ROC arvot). Immuunijärjestelmän pisteet edustaa yhdistetty ROC arvoja CXCL8, VEGF ja PTX-3 (low, medium, high sulku) oli kyky ennustaa merkittävästi elinajan (P 0,001), jossa on parempi hyötysuhde kuin yhden immuunivälittäjäaineiden.

ROC raja-arvot IL-8, PTX3: n ja VEGF laskettiin koko kohortin (6,79 pg /ml, 31.97pg /ml, 6.29pg /ml, vastaavasti) ja käytettiin cutoff valita korkean ja matalan IL-8, PTX-3: n ja VEGF kolorektaalisyövässä potilailla. Alhainen immuuni pisteet määriteltiin yhdistettiin lowIL-8-lowVEGF-lowPTX3 arvoja. Korkea immuuni pisteet määriteltiin yhdistettiin highIL-8-highVEGF-highPTX3 arvoja. Intermediate pisteet määriteltiin jokin muu arvo. Arvot yläpuolella ROC raja liittyi huonompi potilaan selviytymisen CXCL8 (P = 0,008), PTX3 (P = 0,001), VEGF (P = 0,005) ja immuunijärjestelmän pisteet (P 0,001), verrattuna alle ROC sulku.

keskustelu

tässä tutkimuksessa osoitimme, että tulehdusvälittäjiä veressä CRC potilaiden kerätty ennen kirurgista resektiota ehkä ehdokas biomarkkerit ennustaa postsurgical etenemistä CRC. Tunnusomaiset piirteet joukko erilaisia ​​sytokiineja meillä oli mahdollisuus vertailla ennustetekijöitä merkitystä. Osoitimme, että CXCL-8, VEGF ja pitkä pentraksiini 3 olivat parhaat ennustajia ennusteen meidän CRC tutkimuksessa. Lisäksi sytokiini pisteet perustuu yhdistelmä määriä näitä immuunivälittäjäaineiden oli riippumaton tavanomaisen TNM lavastus tunnistamisessa postoperatiivisen sairauden uusiutumista.

Tämä tutkimus noudatti REMARK arvioinnin suuntaviivoista prognoosi- kasvainmerkkiaineet [23]. Olemme kuitenkin tunnustaa joitakin heikkouksia tutkimuksen suunnittelu. Ensin määrällisesti tasot tulehduksellisten välittäjäaineiden ennen leikkausta, mutta ei aikana seurata. Kuitenkin aiemmat tutkimukset osoittivat, että tasot yhteisen ja yleisluontoinen systeeminen tulehduksellinen merkkiainetta CRP ei muuttunut yksilöiden vuosien varrella [24, 25]. Lisäksi olemme määrällisesti lähtötasolle tulehduksellisten välittäjäaineiden päivää ennen leikkausta ja tästä syystä tyypin leikkaushoitoa ei edusta sekoittava muuttuja, koska se ei voi vaikuttaa tulehdusvälittäjäaineen tasoilla tutkimuksessamme. Toiseksi, emme tutkia täsmäsi ohjaus tervettä verenluovuttajien koska tämä ylitti Tämän tutkimuksen tavoitteena. Kolmanneksi tunnustamme rajallinen määrä CRC potilaiden mukana tutkimuksessamme voisi luoda overfitting ennustemalleja. Kuitenkin tapahtumien määrä testattava riippumattomuutta biomarkkereiden keskustellaan yhä [22] ja riippuu siitä, missä määrin ennustetekijöiden vaikutus. Rajallinen Potilaan määrä meidän kohortin tukeutua mahdollisille muotoilu ja lyhyen aikajänteen potilaan ilmoittautuminen, jotka vähentävät valinta harhat ja menetelmiin epäjohdonmukaisuuksia liittyy yleensä suuri retrospektiivinen ikäluokat [26]. Lisäksi käytimme ROC käyrä malleja tuottaa toistettavissa tietojen mittaamalla spesifisyys ja herkkyys, jotka ovat hyödyllisiä benchmark diagnostinen kyky biomarkkereiden eri tutkimuksissa [14].

Tietääksemme tämä on ensimmäinen tutkimus puuttumaan postsurgical ennustetekijöiden merkitystä pentraksiini 3 CRC. PTX3 on immuuni välittäjänä, joka kuuluu erittäin säilyneeseen pentraksiinien, samoin kuin C-reaktiivinen proteiini (CRP) [27]. Sillä on tärkeä rooli homeostatic prosesseissa kuten kudoksen uudelleen, angiogeneesiä ja tulehdusreaktioita ([28], [27], [29] ja on yhdistetty syöpään liittyvien tulehdus [30]. Aiemmissa kliinisissä tutkimuksissa, PTX3 oli havaittu lisätään muut tuumorit, kuten liposarkooma [31], gliooma [32], keuhkosyöpä [20] ja eturauhassyövän [33] verrattuna pariksi terveisiin kontrolleihin [20, 33], tai hyvänlaatuinen liikakasvu. [33], mutta yksikään näiden tutkimusten liittyvät PTX3 tasoilla postsurgical kasvain pahenemisvaiheita. lisäksi meidän sarjaa sytokiineja oli hyödyllistä tutkia immuunivälittäjäaineiden korreloivat keskenään plasmassa ihmisen CRC potilaista. puuttuminen kovarianssi välillä pentraksiini-3 ja muiden inflammatoristen välittäjäaineiden selittää itsenäisen vaikutus ennusteeseen, ja ehdottaa lisäksi, että yhdistetyn tulehduksellinen pisteet saattavat lisätä havaitseminen saantoa postsurgical uusiutumista. huolimatta voimakas korrelaatio TNF-a ja IL-1 b, nämä välittäjäaineiden liittyy potilaan ennustetta vähemmässä määrin kuin PTX3 tasolle, joka ehdottaa, että nämä sytokiinit saattavat olla alhaisempi osallisuudesta metastaattisen uusiutumisen CRC verrataan PTX3. Muissa tutkimuksissa, PTX3 on osoitettu indusoituvan voimakkaasti LPS /TLR [34, 35], jotka voivat myös indusoida CXCL8. Tässä yhteydessä on tärkeää tunnustaa, että korkeammat PTX3 ja CXCL8 veressä potilailla, joilla on taudin uusiutumisesta tässä tutkimuksessa edustaa pelkkä Fenomenologinen näyttöä tulehdusreaktio syöpäkasvaimen kohdalle. Olipa nämä välittäjäaineita tukea paikallista metastaattisen prosessin ja niiden kohdentaminen vaikuttaisi CRC kasvu ylitti Tämän tutkimuksen tavoitteena. Siksi meidän tiedot osoittavat säätelyä seerumin PTX3 Metastasoitunutta CRC potilailla ei ristiriidassa aiempien mekanistinen raportit [36] ja myös antaa lisää todisteita siitä, että tämä sovittelija jotenkin osallistuu kasvaimia reaktiossa.

Yhdessä VEGF, joka inhibiittoria käytetään tällä hetkellä angiogeneesin vastaista tekijä hoitoon vaiheen IV CRC, CXCL8 on myös voimakas promoottori, angiogeneesin, jotka voivat edistää vaskularisaation kasvainkohdassa, lisääntymistä ja etäpesäkkeiden syöpäsolujen ja välittävät rekrytointi ja tuumoria infiltroivien leukosyyttien [37- 39]. Lisäksi meidän tiedot vahvistavat aikaisemmat havainnot ennustetekijöiden kyvyt verenkierrossa VEGF [40, 41] ja CXCL8 [42] CRC potilailla osoittaa, että tämän tyyppinen menetelmä on hyvin toistettavissa.

Tuloksemme viittaavat siihen, että käyttöönotto kiertävän tulehduksen välittäjäaineiden havaitsemiseksi leikkauksen jälkeisen CRC eteneminen olisi tehokkaasti tunnistaa joilla on suuri riski toistumista itsenäisesti tavanomaisten riskien ennustavat. CRC potilaat tunnistetaan korkeat tulehdusvälittäjäaineen plasmassa tulee seurata tiiviimmin seurata riippumatta TNM asema, joka antaisi lisävälineenä päätöksentekoprosessia varten postsurgical seulontaan. Lopuksi, PTX3 ja CXCL8 plasma kvantifiointiin voitaisiin yhdessä VEGF tasot saada paras saanto postsurgical uusiutumisen havaitsemiseksi verinäytteistä. Nämä havainnot antavat perustelut suunnitella suuren mittakaavan kliinisiä tutkimuksia, jotta voidaan vahvistaa ennustetekijöiden kyky näiden tulehduksellisten välittäjäaineiden.

tukeminen Information

S1 Kuva. ROC-kuvaaja analyysi käyriä verrattiin potilaiden omien postsurgical uusiutumisen optimaalisella cutoffs tunnistetaan ROC malli kaikille liukoisen immuunivälittäjäaineiden tutkittu.

ROC-käyrä käyrät optimaalisella cutoffs kutakin immuuni välittäjänä laskettiin ja testattiin niiden kyky havaita postsurgical kasvain toistuminen niiden herkkyys ja spesifisyys. Herkkyys ja spesifisyys: IL-1 (0,88 ja 0,68); IL-6 (0,88 ja 0,59); IL-10 (1 ja 0,40); TNF-a (1 ja 0,05); CCL2 (0,77 ja 0,5); CXCL8 (1 ja 0,64); VEGF: (1 ja 0,66); PTX-3: (0,55 ja 0,90). ROC cut-off-arvot: IL-1 (0,81 pg /ml), IL-6 (5,86 pg /ml), IL-10 (4,14 pg /ml), TNFa: n (49,72 pg /ml ), CCL2 (38,03 pg /ml), CXCL8 (7,01 pg /ml), VEGF: n (39,03 pg /ml), PTX3 (13,68 pg /ml).

doi: 10,1371 /journal .pone.0148186.s001

(PDF) B

Kiitokset

Giuseppe Di Caro tukevat iCare apurahan alkaen Associazione Italiana per la ricerca sul cancro (AIRC).

Tekijät julistaa ole eturistiriitoja.