Krooninen sairaus

tiivistelmä

molekyylimerkit keuhkoputkien nesteet voivat myötävaikuttaa diagnoosin keuhkosyöpään. Olemme aiemmin havaittu merkittävää lisäystä C4d sisältävien täydennys hajoamista fragmentteja bronkoalveolaarisessa huuhtelu (BAL) supernatantit keuhkosyöpäpotilaita kohortin 50 tapauksessa ja 22 ohjaa (CUN kohortti). Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli määrittää diagnostinen suorituskykyä näiden komplementin fragmenteista (jäljempänä yhdessä kuten C4d) keuhkoputkien nesteissä. C4d tasot määritettiin BAL supernatanteissa kahdesta itsenäisestä ikäluokat: CU kohortti (25 tapausta ja 26 tarkastukset) ja HUVR kohortti (60 tapausta ja 98 kontrollit). Sarja spontaani ysköksen näytteitä 68 potilaista keuhkosyöpää ja 10 ohjaa myös käytettiin (LCCCIO kohortti). Yhteensä proteiinipitoisuus, täydentää C4, täydentää C5a, ja CYFRA 21-1 mitattiin myös kaikilla ikäryhmät. C4d tasot olivat lisääntyneet huomattavasti BAL näytteissä keuhkosyöpäpotilaita. Alue ROC-käyrän alla oli 0,82 (95% CI = 0,71-0,94) ja 0,67 (95% CI = ,58-+0,76) CU ja HUVR kohortteja, vastaavasti. Lisäksi toisin kuin muut merkit, C4d tasot BAL näytteet olivat hyvin yhdenmukaisia ​​koko CUN, CU ja HUVR ikäryhmät. Mielenkiintoista, C4d testi selvästi lisääntynyt herkkyys bronkoskopian kahdessa kohorttien jossa Sytologisten tietoja oli saatavilla (CUN ja HUVR kohortteja). Lopuksi LCCCIO kohortin C4d tasot olivat korkeampia ysköksen supernatanteista sairastavilla potilailla keuhkosyöpä (pinta-ala ROC-käyrän: 0,7; 95% CI = +0,56-,83). Lopuksi, C4d on jatkuvasti kohonnut keuhkojen nesteiden keuhkosyöpäpotilaita ja voidaan käyttää parantamaan taudinmääritys.

Citation: Ajona D, Razquin C, pastori MD, Pajares MJ, Garcia J, Cardenal F, et ai. (2015) kohonneet Komplementtiaktivaation Tuote C4d keuhkoputkien nesteet varten diagnoosi keuhkosyöpään. PLoS ONE 10 (3): e0119878. doi: 10,1371 /journal.pone.0119878

Academic Toimittaja: Cordula M. Stover, University of Leicester, Yhdistynyt Kuningaskunta

vastaanotettu: 20 marraskuu 2014; Hyväksytty: 2. helmikuuta 2015 Julkaistu: 23 maaliskuu 2015

Copyright: © 2015 Ajona et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot kuuluvat asiapapereihin.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat ”UTE projekti CIMA”, Espanjan hallitus (Red Tematica de Investigación Cooperativa en Cancer RD12 /0036/0028, RD12 /0036/0040, RD12 /0036/0045, ja RD12 /0036/0062, ja Fondo de Investigación Sanitaria-Fondo Europeo de Desarrollo Regional (EAKR) PI08 /1156, CD09 /00148, PI10 /01652, PI10 /00166, PI11 /00618, PI11 /02688, PI13 /00806, ja PI14 /01686), ja Euroopan yhteisön seitsemännen puiteohjelman (TERVEYS-F2-2010-258677-CURELUNG). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Olen lukenut lehden politiikka ja laatijat käsikirjoitus on seuraavat kilpailevien etujen : väliaikainen patenttihakemus on täytetty Digna Biotech varten Drs. Ajona, Pajares, Montuenga, ja Pio kuin keksijät ”New keuhkosyöpään molekyylimarkkereina.” (Euroopan unionin väliaikainen patenttihakemus no. EP12382113.) Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen PLoS One politiikkaa jakaa tietoja ja materiaaleja.

Johdanto

Keuhkosyöpä on johtava syy syövän liittyvän kuoleman maailmanlaajuisesti [1]. Yleinen viiden vuoden eloonjäämisaste keuhkosyöpä on noin 15-20%, ja alle 5% metastaattisessa tapauksissa [2]. Yksi syy tällaisen synkkä tulos on puute tehokkaiden tekniikoiden varhaiseen taudinmääritys. Tällä hetkellä, keuhkosyöpä diagnoosi sisältää yhdistelmän radiologisten ja histologisten analyysien vaurioita. Joustava bronkoskopia edustaa suhteellisen noninvasive alustava diagnostinen testi yksilöiden tautiepäilyn ja on ensisijainen diagnostinen työkalu, jos potilaalla on keskeisellä paikalla keuhkosyöpään. Bronkoskooppiset tekniikat diagnoosi keuhkosyövän kuuluvat Osteri yksilöitä keuhkoputkien koepala, keuhkoputken harja, keuhkoputken pestä, ja bronkoalveolaarinen huuhtelu (BAL) [3, 4]. Spesifisyys sytologia of bronkoskooppiset materiaali on 100%; kuitenkin, herkkyys on edelleen alhainen, etenkin enemmän syrjäisillä vaurioita, joille lisää invasiivisia diagnostisia menetelmiä rutiininomaisesti tarvitaan [5]. Näin ollen on olemassa kliininen tarve on lisänä markkereita, jotka voivat parantaa herkkyyttä keuhkosyövän diagnostisia menetelmiä.

Useita biomarkkereita havaittavissa keuhkoputkien nesteiden keuhkosyöpäpotilaita on ehdotettu [6, 7, 8, 9, 10 , 11, 12]. Äskettäin olemme osoittaneet, että keuhkosyövän soluja tehokkaasti aktivoida klassisen reitin komplementin. Tämän seurauksena, C4d, vakaa jaettu tuote tämän reitin, on havaittu kohonneita plasman ja BAL näytteitä keuhkosyöpäpotilaita [13]. Tavoitteena tässä tutkimuksessa oli validoida edellisessä havainto riippumaton tapaus-verrokki ikäryhmät. Meidän tavoitteena oli myös vertailla diagnostinen suorituskyky C4d muiden mahdollisten diagnostisten biomarkkerit: CYFRA 21-1, kokonaisproteiinin, C4, ja C5a. CYFRA 21-1 on jo pitkään ollut ehdotettu keuhkosyöpä biomarkkereiden keuhkoputkien nesteissä [7, 14], plasman proteiineihin lisääntyvät BAL nesteiden keuhkosyöpäpotilaita [15], C4 on runsaasti plasman proteiini, joka C4d syntyy sen jälkeen, kun komplementti aktivointi [16], ja C5a on aktiivinen komplementtipalasen kasvoi plasmanäytteistä, joilla on ei-pienisoluinen keuhkosyöpä [17]. Tuloksemme viittaavat siihen, että määritys C4d hengitys- teiden nesteissä suorituskyvyltään muita markkereita ja ne voivat olla käyttökelpoisia diagnostisissa jatkokäsittely potilailla, joilla on keuhkosyöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Kliiniset näytteet

tutkimuksessa oli mukana kolme kohorttia BAL näytteitä ja yksi yskös näytteitä. BAL nesteitä saatiin potilailla, joille tehdään diagnostisia bronkoskopian ja säilytettiin -80 ° C: ssa. Menettely BAL kokoelma on kuvattu aiemmin [15]. Kohortti alkaen Clinica Universidad de Navarra (CUN) sisältyvät BAL näytteet 50 potilaalla on keuhko maligniteetteja ja 22 potilasta, joilla pahanlaatuisten keuhkosairauksia. Lisätietoja tästä kohortin on aiemmin raportoitu [15]. Kohortti Charité-Universitätsmedizin (CU) sisältyvät BAL yksilöt 25 keuhkosyöpäpotilaita ja 26 verrokkien. Ne hallitsevat henkilöt tehtiin bronkoskopia ei-pahanlaatuisten hengitysteiden sairauksien, kuten infektio, hyvänlaatuinen hengitysteiden ahtauma tai sarkoidoosi. Ei ylimääräisiä tietoja oli saatavissa tästä kohortissa. Kolmas kohortti saatiin sairaalassa Universitario Virgen del Rocio (HUVR) sisältäen BAL nesteet 60 keuhkosyöpäpotilaita ja 98 verrokeilla. Ominaisuudet näillä potilailla on esitetty taulukossa 1. Bronkoskopia tarvittiin verrokeilla, koska läsnä on hemoptysis tai keuhkojen vaurio rinnassa-x ray tai CT. Lopuksi Lung Cancer Clinic Katalonian syöpäinstituutti (LCCCIO) kohortti sylki yksilöiden mukana 68 näytettä keuhkosyöpäpotilaita ja 10 näytettä terveiltä yksilöiltä. Näytteet kerättiin spontaanin expectoration, laimennettiin 10 ml: lla suolaliuosta, laajasti vorteksoitiin, ja niitä säilytettiin -80 ° C: ssa. Kaikki tutkimuksessa pöytäkirjat suoritettiin Helsingin julistuksen, hyväksyi tutkimuksen toimikunta yliopiston Navarra (Institutional Review Board # 015-2014), ja kaikki potilaat antoivat kirjallisen tietoisen suostumuksensa. Keuhkokasvaimia luokiteltiin käyttäen WHO 2004 luokituksen ja kansainvälisen järjestelmän Välivarastointi Keuhkosyöpä [18, 19].

Marker mittaukset

C4d sisältäviä fragmentit mitattiin entsyymejä immunosorbenttimääritys (Quidel). Tämä määritys tunnistaa kaikki C4d sisältäviä fragmentteja aktivoitua C4 (C4b, iC4b ja /tai C4d), jotka yhdessä viitataan tässä asiakirjassa kuin C4d. Kvantitatiivinen entsyymi-immunologiset määritykset käytettiin myös määritykset C4 (Assaypro), C5a (R 0,001). Alue ROC-käyrän alla oli 0,73 (95% CI = 0,61-0,84; p = 0,002). Tämä analyysi tehtiin BAL näytteitä kohortin potilaista tässä merkittynä CUN kohortissa. Ominaisuudet näistä potilaista on jo julkaistu [15]. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme pyrkineet vahvistamaan tätä tulosta käyttämällä kahta riippumatonta kohortteja BAL näytteet: HUVR ja CU ikäryhmät. Tässä jälkimmäisessä kohortissa, C4d tasot keuhkosyöpää näytteet ja kontrollit olivat 0,19 (0,11-0,84) ja 0,11 (0,11-0,13) ug /ml, vastaavasti (P ​​ 0,001; Fig. 1A). Alue ROC-käyrän alla oli 0,82 (95% CI = 0,71-0,94; P 0,001). Vuonna HUVR kohortin C4d tasot syövän ryhmässä oli 0,18 (0,15-0,26) ug /ml, ja kontrolliryhmässä oli 0,16 (0,14-0,18) ug /ml (P 0,001; Fig. 1 B). Alue ROC-käyrän alla oli 0,67 (95% CI = +0,58-+0,76; P 0,001). Tässä kohortissa, C4d tasot olivat korkeampia BAL nesteissä pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) potilasta tai entisiä tupakoitsijoita, vaikka erot eivät saavuttaneet tilastollista merkittävyyttä (taulukko 1). Tämän mukaisesti havainnon, edellisessä tutkimuksessa (CUN kohortti) löysimme merkittävä kasvu C4d entiset tupakoitsijat syövän ryhmässä, ja suuntaus kohti korkeampia C4d määrinä potilailla, joilla SCLC [13].

A) C4d tasoa ja ROC käyrä BAL supernatanteista CU kohortissa. B) C4d tasoa ja ROC käyrä BAL näytteitä HUVR kohortissa. Erot ryhmien välillä arvioitiin käyttämällä Mann-Whitneyn U-testiä. Kuuluvilla alueilla ROC käyrät (AUC) ja niihin liittyvät P-arvot on merkitty.

Suorituskyky vertailu C4d muihin molekyylimarkkereina

Sen arvioimiseksi hyödyllisyydestä C4d kuin diagnostinen biomarkkereiden BAL nesteissä, vertasimme sen suorituskykyä muiden mahdollisten diagnostisten molekyylimarkkereina. Tätä tarkoitusta varten, mittasimme tasot CYFRA 21-1, C4 ja C5a CUN, CU, ja HUVR kohortteja. Paitsi CYFRA 21-1 ja C5a CUN kohortin sekä C5a että HUVR kohortin tasot kaikkien merkkiaineiden lisättiin merkittävästi keuhkosyöpäpotilaita (taulukko 2).

kertymistä plasman proteiinien kasvain soluvälitilaan on yhteinen piirre kiinteiden kasvainten [20]. Itse asiassa, plasmaproteiinien löytyy BAL nesteiden keuhkosyöpäpotilaita [15]. Suostumuksella tämän havainnon, kolmen ikäluokat, tasot koko proteiinien havaittiin lisääntynyt BAL nesteissä keuhkosyöpäpotilaita verrattuna kontrolleihin (taulukko 2). Arvioimaan mahdollisuutta että C4d, CYFRA 21-1, C4, ja C5a löytyi BAL näytteissä pelkkänä seurauksena niiden Ekstravasaation verestä, olemme analysoineet rikastuminen näiden merkkiaineiden BAL näytteissä keuhkosyöpäpotilaita suhteen veren avulla kokonaisproteiinipitoisuus referenssinä (taulukko 3). Hyvin samankaltainen mittasuhteet C4 löytyi BAL näytteitä ja verta, mikä viittaa siihen, että esiintyminen komplementtiproteiini kasvaimen mikroympäristössä johtuu pääasiassa sen ekstravasaation. Kuitenkin CYFRA 21-1, C4d, ja C5a osoitti selvästi suurempi osuus BAL nesteissä, mikä viittaa paikalliseen tuotantoon näiden molekyylien sisällä kasvaimen microenvironment.

tekijä, joka vaikuttaa voimakkaasti suorituskyky ja hyödyllisyyttä diagnostisen merkki on sen johdonmukaisuutta eri potilasryhmissä. Siksi verrattuna tasot neljän molekyylimarkkereiden yli kolmen itsenäisen ryhminä. Kuten on esitetty kuviossa. 2, merkittäviä eroja keuhkosyöpää potilaista CUN, CU, ja HUVR kohortteja havaittiin CYFRA 21-1, C5a, C4, ja kokonaisproteiinin (P 0,001, P 0,001, P 0,001 ja P = 0,029, vastaavasti). Havaitsimme korkeampi näiden merkkiaineiden CUN kohortissa, vaikka syynä tämä ero on epäselvä. Kuitenkin tasot C4d olivat hämmästyttävän samankaltaisia ​​kaikissa kolmessa sarjassa ilman merkittäviä eroja (p = 0,922). Konsistenssi C4d tasojen pystyimme ehdottaa C4d raja-arvot tyydyttävin herkkyys ja kaikkien kolmen ikäryhmät. Esimerkiksi, jossa raja-arvo on 0,18 ug /ml, herkkyyttä diagnosoinnissa keuhkosyöpä oli 62%, 52%, ja 53%, joiden spesifisyys 73% (riskisuhde (OR) = 4,35, 95 % CI = 1,45-13,05, P = 0,009), 100%, ja 80% (OR = 4,46, 95% CI = 2,20-9,03, P 0,001) CUN, CU, ja HUVR ikäluokat, vastaavasti. Kun yhdistämällä kolme tutkimusta yhdessä, herkkyys oli 56% ja spesifisyys oli 82% (OR = 5,94, 95% CI = 3,45-10,24, P 0,001). Yhteenvetona voimme päätellä, että C4d on tuotettu keuhkojen kasvain mikroympäristössä, mikä johtaa jatkuva kasvu tämän molekyylin BAL-nesteissä keuhkosyöpäpotilaiden.

A) C4d (tiedot CUN kohortin julkaistu aiemmin [ ,,,0],13]). B) CYFRA 21-1. C) C5a. D) C4. E) yhteensä proteiinia. P-arvot laskettiin käyttäen Kruskal-Wallisin testiä.

määritys C4d BAL supernatanteista lisänä sytologia keuhkosyövän diagnosointiin

vieressä arvioinut tuotantokapasiteetin C4d määrätietoisesti parantamaan diagnostista suorituskykyä sytologinen tutkimisen bronkoskooppiset materiaalia, tekniikka on korkea spesifisyys, mutta pieni herkkyys. Tätä varten käytimme kaksi kohortteja josta olimme sytologia tiedot: CUN ja HUVR ikäryhmät. Vuonna CUN kohortin Osteri BAL näytteistä saatiin spesifisyys 100% ja herkkyys on 32%. Tutkitaan diagnostinen arvo toimittamien tietojen C4d, huomasimme, että tämä markkeri oli merkittävästi lisääntynyt sekä sytologisesti positiiviset ja negatiiviset BAL supernatantit keuhkosyöpäpotilaiden (Fig. 3). C4d-tasot kontrolliryhmässä oli 0,11 (0,11-0,23) ug /ml ja kasvoi 0,33 (+0,23-,5) ug /ml sytologisesti positiivisten näytteiden (P 0,001), ja 0,24 (+0,11-+0,62) ug /ml sytologisesti negatiivista näytettä (P = 0,018). Kuuluvilla alueilla ROC käyrät olivat 0,85 (95% CI = 0,71-0,98; P 0,001) ja 0,67 (95% CI = 0,53-0,81; p = 0,033), vastaavasti. Diagnostinen suorituskyky C4d oli parempi sytologisesti positiivinen BAL näytteitä, vaikka mitään havaittu merkittäviä eroja näiden kahden ryhmän (P = 0,187). Tämä tulos viittaa siihen, että määritys C4d pitoisuudet voivat olla käyttökelpoisia myös sellaisissa tapauksissa, joissa sytologinen tutkiminen BAL nesteiden raportoidaan negatiivinen. Itse asiassa, käyttäen cut-off-arvo aiemmin vahvistettu (0,18 ug /ml), 18 ulos 34 keuhkosyövässä raportoitu negatiiviseksi Osteri luokiteltiin positiivisiksi C4d määrityksen herkkyyden lisäämiseksi diagnosoinnissa keuhkosyöpään 32% 68%, jossa spesifisyys 73%. Tämä havainto oli validoitu kanssa analyysin HUVR kohortissa. Osteri tässä kohortissa tuotti herkkyys 32% ja spesifisyys 100%. Pitoisuus C4d BAL supernatanteissa lisääntynyt merkittävästi sekä sytologisesti positiiviset ja negatiiviset keuhkosyöpä BAL supernatantteja verrattuna verrokkeihin (Fig. 4). C4d tasot kontrolliryhmässä oli 0,16 (0,14-0,18) ng /ml, ja nousi 0,22 (0,16-0,40) ng /ml sytologisesti positiivisten näytteiden (P 0,001), ja 0,18 (0,15-0,23) ug /ml in sytologisesti negatiivista näytettä (P = 0,017). Kuuluvilla alueilla ROC käyrät olivat 0,76 (95% CI = 0,63-0,88; P 0,001) ja 0,63 (95% CI = 0,52-0,74; P = 0,011), vastaavasti. Mitään merkittäviä eroja C4d tasossa ei havaittu sytologisesti positiivisen ja negatiivisen BAL näytteet (P = 0,123). Kanssa raja-arvo 0,18 ng /ml, 19 ulos 41 syöpien raportoitu negatiiviseksi sytologian luokiteltiin positiivisiksi C4d, lisäämällä herkkyyttä diagnosoinnissa keuhkosyövän 32%: sta 63%, ja spesifisyys 80 %.

P-arvot laskettiin käyttämällä Mann-Whitneyn U-testiä. Kuuluvilla alueilla ROC käyrät (AUC) ja niihin liittyvät P-arvot on esitetty.

P-arvot laskettiin käyttämällä Mann-Whitneyn U-testiä. Kuuluvilla alueilla ROC käyrät (AUC) ja niihin liittyvät P-arvot on merkitty.

C4d tasot ysköksen supernatanteista keuhkosyöpäpotilaita

diagnoosi keuhkosyövän tutkimalla yskös on houkutteleva vaihtoehto bronkoskopia. Jotta alustavassa arvioida hyödyllisyys C4d diagnostisena markkerina tämän biologisen näytteen, C4d tasot määritettiin spontaanisti ysköksen näytteitä keuhkosyöpään potilailla (n = 68) päässä LCCCIO kohortissa. C4d vaihtelivat +0,04-+0,56 ug /ml mediaani (IQR) 0,06 (0,06-0,07) ug /ml. Mitään merkittävää esiintynyt eroja tasot merkkiaineen ja kliinis tietoja, kuten sukupuoli, tupakointi, histologia (NSCLC vs. SCLC) tai vaiheen (I-III vs. IV). Lopuksi vertasimme C4d-tasot näiden yskös näytteiden tasoilla 10 terveillä verrokeilla. Kuten on esitetty kuviossa. 5, C4d tasot olivat hieman korkeammat ysköksen supernatanteista potilaiden keuhkosyöpä kuin niillä, verrokeilla (p = 0,047). Alue ROC-käyrän alla oli 0,7 (95% CI = 0,56-0,83, p = 0,047). Jossa on 0,06 ug /ml cut-off, herkkyys ja spesifisyys olivat 54% ja 80%, vastaavasti. Lopuksi, C4d tasot ovat merkittävästi korkeampia spontaaniin ysköksen näytteitä keuhkosyöpään kuin potilailla, joilla näitä näytteitä syöpä-free-aiheista.

P-arvot laskettiin käyttämällä Mann-Whitneyn U-testiä. Alue ROC-käyrän alla (AUC) ja siihen liittyvä P-arvo on merkitty.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa osoitamme, että C4d sisältävä täydennys hajoamista fragmentteja (yhteisesti nimitystä C4d) ovat koholla keuhkoputkien nesteissä keuhkosyöpäpotilaita ja niiden määräytyminen toimii paremmin kuin aiemmin ehdottanut proteiini biomarkkereita keuhkosyövän diagnoosi. Johtopäätöksemme tukee neljä suurta huomiota: i) olemme validoitu, kaksi erillistä ikäluokat, lisääntyminen C4d aiemmin havaittu kohortin BAL näytteiden keuhkosyöpäpotilaita [13]; ii) ei havaittu eroja tasojen merkkiaineen vastapäätä BAL näytettä keuhkosyöpäpotilaita kolmesta riippumattomasta kohortteja; iii) C4d määrällinen paransi herkkyyttä cytologic tutkimisen BAL nesteitä; ja iv) C4d tasot hieman lisääntynyt limaneritys supernatanteista keuhkosyöpäpotilaiden.

Toistaiseksi pyrittävä löytämään kliinisesti arvokas diagnostinen merkkiaineita keuhkosyövän on joko epäonnistuneet tai oli vähän menestystä. Tämä selittyy osittain vähäisestä toistettavuus poikki riippumattomia tutkimuksia, koska suuri geneettinen ja fenotyyppinen heterogeenisyys keuhkotuumoreiden [21]. Tämän rajoituksen voittamiseksi, on ehdotettu, että immuunijärjestelmän liittyviä markkereita voisi olla homogeeninen ja herkkä kuin syöpää peräisin markkereita [22]. Tässä mielessä aikana neoplastisen transformaation, keuhko- kasvainsolujen eri histologisia alatyyppejä voidaan tunnistaa komplementtisysteemi [17], [23, 24]. Täydennys on tärkeä osa synnynnäisen immuunivasteen, joka puolustaa isännän vastaan ​​ei-itse elementtejä. Mielenkiintoista, kohonneen ilmentymisen komplementti-inhibiittoreiden, keuhkosyöpä solut ohjaavat komplementin aktivaation ja ovat vastustuskykyisiä täydentää sytotoksisuus [23, 24, 25, 26, 27]. Tämä ohjattu immuunivaste voi johtaa pysyvään vapautumiseen täydentää fragmenttien kasvaimen mikroympäristössä, mikä selittää, miksi C4d, fragmentti on peräisin komplementin C4, on lisääntynyt biologisissa nesteissä potilailta, joilla on keuhkosyöpä [13]. Mielenkiintoista, havaitsimme hyvin samankaltaisia ​​pitoisuuksia C4d vastapäätä BAL näytteitä kolmesta tutkittu ikäryhmät. Tämä on merkityksellinen seikka, koska standardointi mittausten eri tutkimusten välillä on suuri ongelma biomarkkereiden löytö [28, 29]. Suhteessa ensisijainen lähde C4d, tämä molekyyli on proteolyyttinen fragmentti, komplementin C4 syntyy aktivoinnin jälkeen klassisen komplementtireitin [16]. Siksi uskottavin selitys sen läsnäoloa kasvain microenvironment olisi sen paikallisen tuotannon aktivoinnin jälkeen tämän kanonisen reitin. Emme kuitenkaan voi sulkea pois muita mekanismeja. Esimerkiksi eksoproteaaseja on läsnä biologisissa nesteissä syöpäpotilaille voi tuottaa peptidejä komplementin proteiinien [30]. Toisaalta, vaikka C4d tasot ovat myös lisääntynyt plasmassa keuhkosyöpäpotilaita [13], tasot merkkiaineen keuhkoputkien nesteet ovat huomattavasti korkeammat kuin odotettua ekstravasaation, joka suosii paikallista alkuperää C4d.

Olemme myös havainneet, että C4d toimivat paremmin kuin muut täydennys liittyviä markkereita, C4 ja C5a tai ehdotettu tuumorimarkkeri CYFRA 21-1. Kun kyseessä on C4, esivaihemolekyylin varten C4d, voimme päätellä, että sen läsnäolo hengitysteiden nesteissä johtuu lähinnä sen ekstravasaation verestä. Vastaavasti kohonnut muiden extravasated plasman proteiineihin, kuten komplementin tekijää H tai albumiinia, aiemmin havaittu keuhkoputkien nesteissä keuhkosyöpäpotilaita [15]. Toisaalta, meidän tiedot osoittavat, että paikallista tuotantoa C5a: n, joka on anafylatoksiini, joka voidaan valmistaa keuhkosyövän soluja [17]. Kuitenkin, tämä markkeri havaittiin merkittävästi lisääntynyt BAL näytteissä keuhkosyöpäpotilaita vain yksi kolmesta kohortteja. Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin CYFRA 21-1, yksi tutkittu keuhkosyövän biomarkkereiden kirjallisuudessa [7, 14]. Tuloksemme ehdotti paikallista tuotantoa CYFRA 21-1 sisällä kasvain microenvironment, mutta sen tasoilla koko kohorteissa olivat huonosti johdonmukaisia ​​ja erot pahanlaatuiset ja ei-pahanlaatuiset näytteitä ei löydy yhdessä sarjassa. Nämä havainnot viittaavat siihen, että C5a: n ja CYFRA 21-1 tuotetaan läsnä keuhko- kasvainten, mutta myös, kun läsnä on ei-pahanlaatuisia tulehduksellisia tiloja yhteinen potilailla, joille tehdään bronkoskopia.

Koska suhteellisen alhainen herkkyys sytologista tutkimista bronkoskooppiset yksilöitä, enemmän invasiivisia diagnostisia testejä tarvitaan yleensä. Tässä yhteydessä diagnostinen menettely järkevää määritellä, mitkä potilaat, joilla epäiltiin keuhkosyöpää, mutta negatiivinen bronchoscopies, olisi sovellettava ylimääräisiä diagnostisia testejä olisi kliinisesti merkittävää. Tässä tutkimuksessa lisäämällä C4d määrällisessä diagnostisen menettelyn lisääntynyt herkkyys bronkoskopia, vaikka vähensi spesifisyys. Väheneminen spesifisyys voi rajoittaa se hyväksytään koska rutiinikäyttöön kliinisessä diagnostinen työkalu. Kuitenkin varmistettava, että merkkiaineen poikki riippumaton kohorteissa keuhkoputkien nesteen näytteiden ja sen paremman suorituskyvyn kuin aikaisemmin ehdotettu biomarkkereiden edistettävä C4d paneelin biomarkkereiden täydentämään sytologia että taudinmääritys. Tämä on tärkeä seikka, sillä uudet paneelit biomarkkerit kuten autovasta, MikroRNA tai proteomic luokittelijoiden ovat tuottaneet lupaavia tuloksia verinäytteitä keuhkosyöpään kliinisistä ikäluokat [31, 32, 33]. Lisäksi meidän tiedot viittaavat siihen, että C4d arviointi ei-invasiivisia yskös näytteitä voidaan myös olla hyödyllinen väline keuhkosyövän diagnoosi. Tämä havainto, perustuu pieneen kohortin yskös näytteitä, pohdittava vielä arviointia suuremmissa sarjassa käytetään enemmän kliinisesti merkittäviä säätimet hyvänlaatuisen keuhkosairaus. Muita näkökohtia, jotka on selvennettävä ovat määrityksen suorituskykyyn eri histologisten alatyypeistä sekä vaikutuksesta tupakoinnin, ja erityinen ei-pahanlaatuisia hengityselinten sairauksia ja hoitoja C4d tasoilla. Tällä hetkellä voimme päätellä, että C4d tasot ovat jatkuvasti lisääntyneet keuhkoputkien nesteissä keuhkosyöpäpotilaita ja voi täydentää sytologia että taudinmääritys.

Kiitokset

Kiitämme Amaya Lavin, Usua Montes ja Ana Remirez tekniseen tukeen.