Krooninen sairaus

tiivistelmä

Lisäksi proteiinia koodaavan geenien ihmisen genomin tekee suuren määrän ei-koodaavaa RNA: iden. Pitkien ei-koodaavat RNA: t (lncRNAs) on kuvattu suurin alaluokka ei-koodaavan transcriptome ihmisen ei-koodaava RNA: t. Viime vuosina, lncRNAs on katsottu olevan keskeinen säätävät kasvaimen käyttäytymisen. Tässä tutkimuksessa perustuu aikaisempiin tutkimuksiin, tutkimme ilmaisun ja biologisen roolin vastatunnistettua syöpään liittyvien lncRNA,

lncRNA-uc002kmd

.

1

. Analysoimme suhde

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja peräsuolen syöpä (CRC) yhteensä 45 CRC ja pariksi vieressä, ei-kasvain kudosnäytteitä. Huomasimme, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

ilmentyminen tavallisesti erittäin ilmaistu karsinooma verrattuna kudoksen vieressä karsinooma. Läpi sarjan kokeita, tulokset osoittivat, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

säätelee CD44 molekyylipai- houkuttimena miR211-3p. Tuloksemme osoittivat, että yli-ilmentyminen

lncRNA-uc002kmd

.

1

solujen lisääntymisen tehostuneen CRC.

Citation: Wu X, hän X, Li S, Xu X, Chen X, Zhu H (2016) Long koodaamattomalla RNA ucoo2kmd.1 Säätelee CD44-Dependent Cell Growth kilpailemalla miR-211-3p in peräsuolen syövän. PLoS ONE 11 (3): e0151287. doi: 10,1371 /journal.pone.0151287

Editor: Yifeng Zhou, Medical College of Soochow yliopisto, Kiina

vastaanotettu: 10 tammikuu 2016; Hyväksytty: 25 helmikuu 2016; Julkaistu: 14 maaliskuu 2016

Copyright: © 2016 Wu et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperin.

Rahoitus: Project tukivat apurahan Natural Science Foundation Zhejiangin maakunnassa Kiinassa (LY16H160048). Myös tätä työtä tukivat avustusta Wenzhou Public Welfare Science and Technology Project (Y20140707), myös tukivat avustuksen inkubaatio projekti Ensimmäinen Affiliated sairaala Wenzhoun Medical University (FHY2014009). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä (CRC) on tärkeä kansanterveydellinen ongelma maailmanlaajuisesti ja on edelleen suuri syy syövän kuolleisuus kehittyneissä maissa, mikä johtuu suurelta osin sen taipumus etäispesäkkeitä [1]. Se on toiseksi yleisin syöpä diagnoosi naisten ja kolmanneksi yleisin miesten [2]. Vaikka saavutukset peräsuolen syövän tutkimus ovat merkittäviä, uusia ja tehokkaita hoitostrategioita tarvitaan edelleen. Etsittäessä uusia biomarkkereita metastasointiin peräsuolen syöpä on kiireellinen.

Long ei-koodaavat RNA: t (lncRNAs), jotka käsittävät ei-koodaavan selostukset yli 200 nukleotidin, on kuvattu suurin alaluokka ei-koodaavan transcriptome ihmisillä [3]. Merkittävä määrä menneisyyden tutkimus on keskittynyt sääntelyn ja rakenteellinen rooli lncRNAs useissa merkittävissä biologisissa prosesseissa, kuten kromosomin inaktivaatio, solujen erilaistuminen, leimautuminen ja kehitystä, ja solujen lisääntymistä [4, 5]. Viime vuosina, jolla on laaja rooli lncRNA syövän kehittymisessä, yhä useammat tutkimukset sen yhdessä esiintymisen syövän kehittymisen (esim tutkimukset koskien CRC [2, 6], ruokatorven okasolusyöpä (ESCC) [7], ja mahasyövän (GC) [8]) on julkaistu. Huolimatta näistä havainnoista, nykyinen tietämys ilmentymiskuviot ja toiminnallista roolia lncRNAs CRC edelleen vähäistä.

Äskettäin yksi tutkimuksessa löytäneet uuden lncRNA GC,

lncRNA-uc002kmd

.

1

, jota kutsutaan myös

GAPLINC

. Tämä lncRNA muodostaa molekyylitasolla houkuttimena miR211-3p, joka kohdistuu CD44 hajoamisesta, ja yli-ilmentyminen

lncRNA-uc002kmd

.

1

voitaisiin näin ollen parantaa CD44 ilmaisun kilpailemalla miR-211- 3p, joka rakentaa malli

lncRNA-uc002kmd

.

1

-välitteisen solujen vaeltamiseen ja lisääntymistä mahasyövän [9, 10]. Koska yksi otaksuttu kantasolujen merkkiaineita, CD44 on avainasemassa monissa solun toiminnoissa, kuten syöpäsolun kasvua ja muuttoliike [11]. Lisäksi aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että CD44 on tunnettu kantasolujen merkkiaine CRC [12].

perusteella näitä tietoja emme arveltu tässä tutkimuksessa, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

voisi olla samantyyppinen rooli CRC. Tämän hypoteesin testaamiseksi, me päätellä tapa rajata transkription poikkeavuus

lncRNA-uc002kmd

.

1

välillä CRC ja pariksi viereisen ei-neoplastisia kudoksia.

materiaalit ja menetelmät

Tutkittavat

homogeeninen Han-kiinalaiset käsitti aiheita osallistuvat tähän tutkimukseen. Neljäkymmentäviisi CRC ja vastaavien viereisten kudosnäytteitä saatiin potilailla, joilla oli ensimmäisen Kumppani Hospital Wenzhoun Medical University (Wenzhou). Ei ole asetettu rajoituksia iän, vaiheen CRC, sukupuoleen tai histologian. Työhönoton yhteydessä jokainen osallistuja oli määrä haastattelussa käyttäen epidemiologisia kyselyn jälkeen tarjoamalla kirjallinen lupa. Lääketieteellinen eettinen komitea Wenzhoun Medical University hyväksyi tutkimuksen. Kliiniset ominaisuudet kaikki potilaat on lueteltu taulukossa 1, kuten on kuvattu yksityiskohtaisesti aiemmin [13].

Soluviljely

Ihmisen paksusuolen syövän solulinjat, HCT116 ja SW480, olivat ostettuja Cell Bank of Type Culture Collection Kiinan tiedeakatemia, Shanghai Institute of Cell Biology, ja siirrostettiin alle 6 kuukautta. Soluviljelymenettelyistä on julkaistu muualla [13]. Soluja viljeltiin 37 ° C: ssa, 5% CO

2 RPMI-1640-väliaineessa, jota täydensi 10% naudan sikiön seerumia, penisilliiniä ja streptomysiiniä 10 ml: viljelymalja.

RNA ja reaa- kvantitatiivinen polymeraasiketjureaktio

TRIzol

® reagenssia (Invitrogen) käytettiin eristämään kokonais-RNA soluista ja kudoksista, mukaan valmistajan ohjeiden mukaisesti. Suhteellisen geeniekspression

GAPLINC

määritettiin käyttäen ABI Prism 7500 Sequence Detection järjestelmän (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).

GAPDH

käytettiin sisäisenä standardina valvonnan, ja kaikki reaktiot suoritettiin kolminkertaisina [14, 15]. Käytetyt alukkeet qPCR amplifiointiin eteenpäin GTTTCCTGGAAGGGCATTTT ja käänteinen CAATCAGGGCTCTTGGACTC.

rakentaminen reportteri plasmidien

Menetelmä rakentamiseen toimittaja plasmidien on julkaistu muualla [9]. PGL3-promoottori Vektori (GENECHEM) käytettiin rakentaa plasmideja pGL3-

lncRNA-uc002kmd

.

1

-3’UTR (plasmidin, joka sisältää

lncRNA-uc002kmd

.

1

3’UTR) ja pGL3- CD44-3’UTR. Kaikki konstruktit todennettiin DNA-sekvensoinnilla.

Transient transfektiot ja Lusiferaasimäärityksiä

HCT116 ja SW480 transfektoitiin toimittaja plasmideilla käyttämällä Lipofectamine 2000 (Invitrogen, CA, USA), mukaisesti valmistajan ohjeet. Käyttö Dual-Luciferase Reporter määritystä (Promega, Madison, WI, USA) mittaamiseksi lusiferaasiaktiivisuutta on julkaistu muualla [16]. Kolme riippumatonta koetta suoritettiin ja kussakin ryhmässä 6 replikaattia.

aktinomysiini D määritys

HCT116 ja SW480 transfektoitiin ohimenevästi käyttämällä Lipofectamine 2000 (Invitrogen) ja ko-transfektoitiin miR-211-3p, kuten, 24 h; sitten solut altistettiin aktinomysiini D (Sigma, St Louis, MO). Solut kerättiin ja vakautta

lncRNA- uc002kmd

.

1

mRNA analysoitiin käyttämällä kvantitatiivista käänteistranskriptaasi-PCR (qRT-PCR), kuten aikaisemmin on kuvattu [13].

Western blot

Western blot analyysi suoritettiin arvioida CD44 ja â-toiminta ilmaisua, kuten aiemmin on kuvattu [13]. Western-blottaus-analyysi toistettiin vähintään kolme kertaa.

solunelinkykyisyysmääritys

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) järjestelmä (Dojindo Laboratory, Kumamoto, Japani) käytettiin mittaamaan solujen elinkelpoisuus, mukaan valmistajan ohjeiden [16]. Oli 6 matkii kussakin ryhmässä, ja kokeet toistettiin vähintään 3 kertaa.

Tilastolliset analyysit

Korrelaatio ilmaus

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja

CD44

geenin CRC kudoksessa arvioitiin käyttämällä yksisuuntaista varianssianalyysi ja lineaarisen regression malleja. Erot ryhmien välillä arvioitiin käyttäen pariksi, 2-tailed Studentin t-testiä.

P

-arvo 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Cellular luonnehdinta

LncRNA-uc002kmd

.

1

Voit selvittää matkapuhelinverkon lokalisaatio

lincRNA-uc002kmd

.

1

, tasot ydinvalvonnasta transkripti (

U6

) ja soluliman ohjaus transkripti (

GAPDH

mRNA) havaittiin RT-qPCR ydinvoiman ja sytoplasman jakeet, vastaavasti. Sillä HCT116 solulinja, qRT-PCR-analyysi paljasti, että (keskiarvo ± SEM) 89,8%

lincRNA-uc002kmd

.

1

havaittiin tumafraktios-, ja 13,1% sijaitsi solulimafraktio. Samanlaisia ​​tuloksia saatiin kanssa SW480-solulinjan, erityisesti, 89,2% ja 11,8%

lincRNA-uc002kmd

.

1

havaittiin tumafraktios- ja sytoplasmisen jakeet, vastaavasti (kuvio 1A) .

(A) tasot ydinvalvonnasta transkriptin (U6), sytoplasman ohjaus transkripti (GAPDH mRNA) ja

lincRNA-uc002kmd

.

1

arvioitiin qRT- PCR ydin- ja sytoplasman jakeet. Tiedot ovat keskiarvo ± SEM. (B) Northern blot-analyysi

lincRNA-uc002kmd

.

1

ilmentymisen CRC-soluissa. (C) Suurin CSF tulokset

lincRNA-uc002kmd

.

1

analyysillä kanssa PhyloCSF. Tilanne on -178,6075. (D)

lincRNA-uc002kmd

.

1

ilmentyi korkeammalla tasolla CRC kudoksissa verrattuna vastaamaan CRC viereisiin kudoksiin. Ilmaisu taso

lincRNA-uc002kmd

.

1

analysoitiin qRT-PCR normalisoitu

GAPDH

. Tiedot esitetään keskiarvona ± SEM kolmesta itsenäisestä kokeesta. (E) Lineaarinen korrelaatiot

lincRNA-uc002kmd

.

1

ekspressiotasot ja CD44 mRNA testattiin. Suhteellinen ilmentyminen arvo normalisoitiin

GAPDH

ekspressiotason. (F, G)

lincRNA-uc002kmd

.

1

ilmaisu vaikutti merkittävästi CD44 mRNA ilmaisun. Knockdovvn

lincRNA-uc002kmd

.

1

vähentynyt CD44 ilmaisua, vaikka ektooppinen ilmentyminen GAPLINC lisääntynyt CD44 mRNA-tasolla. (H) proteiini tasot CD44 arvioitiin CRC soluissa (HCT116-solut ja SW480-solut) Western blot.

LincRNA-uc002kmd

.

1

voitiin havaita yhtenä transkriptio odotetun kokoisia northern blottauksella (kuvio 1 B) CRC-soluissa. Samalla tutkimme koodaus mahdollisuuksia

lincRNA-uc002kmd

.

1

käyttäen PhyloCSF The PhyloSCF pisteet on -178,6075, tämä tulos osoitti alhainen koodaus mahdollisuuksia

lincRNA -uc002kmd

.

1

(kuvio 1 C).

LncRNA-uc002kmd

.

1

on säädellään ylöspäin CRC kudoksissa

ilmaisu taso

lncRNA-uc002kmd

.

1

tutkittiin käyttäen reaaliaikaista PCR: 45 paria CRC kudosten ja sovitettu viereisen normaalia kudosta. Yksityiskohtaiset kliiniset piirteet on esitetty taulukossa 1.

lncRNA-uc002kmd

.

1

transkriptit ilmaistiin korkeammilla tasoilla kasvainkudoksessa verrattuna viereiseen normaaliin kudokseen (kuvio 1 D).

Association of

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja

CD44

CRC

Testasimme korrelaatio

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja

CD44

toisessa 15 paria CRC adjuvanttia ei-syöpä kudoksiin. Tulokset osoittivat, että potilaat, joilla on korkeampi

lncRNA-uc002kmd

.

1

ekspressiotasot CRC kudoksessa näkyvissä merkittävää säätely ylöspäin CD44 (

R

2

= 0,24,

P

0,05; Kuva 1 E).

erityisten siRNA: t, knockdovvn

lncRNA-uc002kmd

.

1

oleellisesti vähentynyt CD44 ilmaisu, kun taas yli-ilmentyminen

lncRNA-uc002kmd

.

1

parannettu CD44 mRNA (kuvio 1 F ja 1G). Western Blot tuloksia osoittivat johdonmukaisesti, että knockdovvn

lncRNA-uc002kmd

.

1

laski CD44-proteiini tasoilla HCT116 solulinjassa, kun taas yli-ilmentyminen lncRNA-uc002kmd.1 lisääntynyt CD44-proteiinia tasoilla. Samanlaisia ​​tuloksia löydettiin SW480 solulinjassa (kuvio 1 H).

LncRNA-uc002kmd

.

1

säätelee

CD44

ilmaisun kilpailemalla miR -211-3p

Sattumalta miRNA tunnetaan miR-211-3p oli ennakoi maalin sekä

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja CD44. Tarkistaa rooli miR-211-3p CRC-soluissa, olemme kloonanneet 3 ’UTR: CD44 ja

lncRNA-uc002kmd

.

1

alavirtaan lusiferaasigeeniin ja ko-transfektoitiin nämä toimittajat kanssa miR-211-3p jäljittelee CRC soluissa. Kuten on esitetty kuviossa 2A, miR-211-3p vähensi merkittävästi lusiferaasin signaalit molempien toimittajille. Lisäksi mittasimme CD44 ja

lncRNA-uc002kmd

.

1

tasoilla CRC soluissa jälkeen käsittelemällä MIR-211-3p matkii. Kuten odotettua, CD44 ja

lncRNA-uc002kmd

.

1

tasot olivat merkittävästi vähentynyt (kuvio 2B). Tämän lisäksi testaamme ilmentymistason CD44 ja miR-211-3p 15 pareittain CRC kudoksissa, tulokset osoittavat negatiivista korrelaatiota miR211-3p ja CD44 ekspressiotasot (

R

2

= 0,24,

P

0,05; Kuva 2C).

(A) sekä

lincRNA-uc002kmd

.

1

ja CD44 on kohdistettu miR-211-3p. MiR-211-3p vähensi lusiferaasi signaaleja sekä

lincRNA-uc002kmd

.

1

ja CD44. (B) CD44 ja

lncRNA-uc002kmd

.

1

tasot olivat merkittävästi vähentynyt. Tiedot ovat keskiarvo ± SEM, normalisoitu

GAPDH

. (C) negatiivinen korrelaatiot

lincRNA-uc002kmd

.

1

ekspressiotasot ja CD44 mRNA testattiin.

Kun knockdovvn

lncRNA- uc002kmd

.

1

siRNA, kloonasimme 3’UTR alueen CD44 osaksi lusiferaasireport- ja ko-transfektoitiin konstruktilla kanssa

lncRNA-uc002kmd

.

1

siRNA tai ohjaus siRNA. Tulokset jälkeen osoittivat, että pudotus on

lncRNA-uc002kmd

.

1

vähensi intensiteetti lusiferaasin. Kaikki nämä tulokset viittasivat siihen, että miR-211-3p voitaisiin kohdistaa

lncRNA-uc002kmd

.

1

ja CD44, ja että

lncRNA-uc002kmd

.

1

tarvitaan runsaasti ilmentymisen CD44 (kuvio 3A).

(A) reportteri vektori kotransfektoitiin CRC-solut, jotka käsiteltiin

lncRNA-uc002kmd

.

1

siRNA tai kontrolloida siRNA. Lusiferaasisignaali merkittävästi vähentynyt. (B) Solut kerättiin ja vakaus

lncRNA-uc002kmd

.

1

mRNA analysoitiin qRT-PCR suhteessa aikaan 0, kun estää uusien RNA-synteesin aktinomysiini D; tiedot ovat keskiarvo ± SEM, normalisoitu

GAPDH

. (C) HCT116 ja SW480-solut ympättiin 96-kuoppaisille levyille, kun on transfektoitu, ja solujen lisääntyminen suoritettiin päivittäin 3 päivää käyttäen CCK-8-määrityksessä. Kuusi jäljittelee kunkin ryhmän ja koe toistetaan kolme kertaa. Data aremean ± SEM. *

P

0,05 verrattuna kontrolleihin. (D) Tiedot osoittivat kasvaimen määriä ksenograftien kussakin ryhmässä 4 viikon kuluttua ihon alle istutettiin vakaa CRC soluja. Kasvaimen tilavuutta kuusi nude-hiirissä kunkin ryhmän esitetään eri ajankohtina. *

P

0,05 verrattuna kontrolleihin.

LncRNA-uc002kmd

.

1

moduloi solujen kasvua

Tutkimme lisäksi vaikutusta

lncRNA-uc002kmd

.

1

soluproliferaatiota

vitro

. CRC-solut transfektoitiin miR-211-3p jäljittelee tai joiden miR-211-3p estäjä, ja transkriptio tasot

lncRNA-uc002kmd oli

alassäädetty jälkeen RNA-synteesin estettiin aktinomysiini D läsnäolo miR-211-3p (alassäädetty 100%: sta 54% ± 3,2%, kun läsnä on 1 pmol miR-211-3p, ja alassäädetty 100%: sta 28% ± 3,2%: n läsnä ollessa 40 pmol miR-211-3p).

suoritetaan CCK-8 määrityksiä vaikutusten testaamiseksi

LincRNA-uc002kmd

.

1

soluproliferaation CRC-soluissa. Havaitsimme johdonmukainen lisäys solujen lisääntymisen ja HCT116 (38% lisäys) ja SW480 (31% lisäys) solulinjat, kun

LncRNA-uc002kmd

.

1

yliekspressoitui fysiologisessa tasoilla CCK -8 määrityksissä, verrattuna kontrolliin. Kun taas

lncRNA-uc002kmd

.

1

alassäädetty Solujen leviämisen HCT116 (50% vähennys) ja SW480 (27% vähennys) solulinjat laski johdonmukaisesti (kuvio 3C) .

LncRNA-uc002kmd

.

1

kiihdyttää kasvaimen kasvua vierassiirrekokeissa

tutkia biologista merkitystä on

LncRNA-uc002kmd

.

1

syöpäkasvainten kasvuun, ksenografti injektoidaan subku- CRC soluihin. Kuten on esitetty kuviossa 3D, kasvainten kasvua jopa säädelty

LncRNA-uc002kmd

.

1

-ksenografteissa merkittävästi lisääntynyt verrattuna kontrolliryhmän ksenografteista: 423,3 ± 71,6 mm

3 vs. 600 ± 17,6 mm

3 HCT116-solut (

P

0,05); ja 420 ± 70,8 mm

3 vs. 616,7 ± 21,7 mm

3 SW480-solujen (

P

0,05), tässä järjestyksessä.

Keskustelu

tässä tutkimuksessa olemme tunnistaneet

lncRNA-uc002kmd

.

1

CRC ja totesi, että se oli dramaattisesti säädellään ylöspäin CRC kudokseen käyttämällä RT-PCR-määritys, joka osoittaa potentiaalifunktio on

lncRNA-uc002kmd

.

1

CRC. Useita kokeiluja on esitetty korrelaatio

lncRNA-uc002kmd

.

1

, miR-211-3p ja CD44, todetaan, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

säätelee CD44-riippuvaista solukasvua kilpailemalla miR-211-3p kolorektaalisyövässä. Meidän tulokset osoittavat merkittävää roolia

lncRNA-uc002kmd

.

1

aikana CRC tuumorigeneesin.

LncRNAs ovat nousemassa avaintoimijoita eri biologisia perusprosesseja ja kasvava määrä tutkimus on ehdottanut, että lncRNAs ovat tärkeitä toimijoita syövän kehittymisessä [17-19]. Kaikkein tunnettu lncRNA, hotair, on säädelty sappirakon syöpä (GBC), joka johtaa kasvaimen etäpesäkkeiden kautta muuttanut metylaatio histoni H3 lysiinin 27 (H3K27) ja geenien ilmentyminen [20, 21].

Linc-POU3F3

lisääntyy ESCC näytteistä, jotka ollessaan vuorovaikutus

EZH2

edistää metylaatio

POU3F3

, sitten edistää kasvainten kehittymistä [22]. Muut kuin nämä selityksin-lncRNA, ei-selityksin lncRNA on ollut haluttu vaikutus kehitykseen monien pahanlaatuisten kasvainten, kuten paksusuolen ja peräsuolen syöpään liittyvän lncRNA (CCAL) edistää CRC etenemisen aktivoitua Wnt /β-kateniinin reitin [23] . Tuoreessa raportissa todetaan, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

, joka tunnetaan myös nimellä GAPLINC, oli säädellään ylöspäin GC ja näytetään myös huomattavia ennakoivaa vaikutuksia diagnoosi ja ennusteen mahasyövän, kun taas , tutkimuksessamme,

lncRNA-uc002kmd

.

1

oli mukana edistämiseen CRC kehitystä.

Seuraavaksi tutkimme mekanismeja, joilla

lncRNA -uc002kmd

.

1

kykenee sen funktio pahanlaatuinen CRC fenotyypit. Tuloksemme osoittavat selvästi, että kun hiljentäminen

lncRNA-uc002kmd

.

1

ilme, CRC soluproliferaatiota estyi. Tuloksemme vahvisti myös, että

lncRNA-uc002kmd

.

1

muodostaa molekyylitasolla houkuttimena miR211-3p. On yleisesti tiedossa, että miRNA ovat lyhyitä RNA-sekvenssejä, vaikka kohde-sekvenssit 3’UTRs mRNA sitten negatiivisesti manipuloida geeniekspression. MiRNA ovat mukana erilaisissa biologisissa prosesseissa, kuten solujen lisääntymisen, kehitys, erilaistumista ja aineenvaihduntaa. Yleensä miRNA on keskeinen rooli geenisäätelyn pääasiassa kohdistamalla runsas proteiinia koodaavan geenien. Yhä on kuitenkin enemmän tutkimus on todennut, että miRNA voi myös hoitaa tehtävänsä kohdistamalla lncRNAs [24]. Teoria kilpailuun endogeenisen RNA osoitti, että koodaus geenit ja lncRNAs voi säädellä toisiaan niiden kilpailu miRNA sitoutumisen [25]. Tämän teorian mukaan, lncRNAs voivat vaikutusvaltaansa tavoitteista palvelemalla houkuttimina varten miRNA.

Tässä artikkelissa, me tunnistaa CD44-proteiini on tärkeä osa

lncRNA-uc002kmd

.

1

– miRNA sääntelyverkon. Käyttämällä lusiferaasireportterigeenin määritys, olemme huomanneet, että CD44 on tukahdutettu miR-211-3p, ja tämä toiminto on heikennetty

lncRNA-uc002kmd

.

1

yliekspressio. Huomasimme myös, että taso CD44-proteiinin vähitellen lisääntyi lisääntyvää

lncRNA-uc002kmd

.

1

.

CD44 on solun pinnan läpäisevä glykoproteiini, joka on merkittävä rooli useissa biologisissa toiminnoissa [26]. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että CD44 on ratkaiseva merkitys AML kehityksen ja muunnelmia CD44 voivat vaikuttaa sen ilmaisua, mikä johtaa vaihteleviin riskejä AML [15]. Lisäksi CD44 on tärkeä kantasolujen markkerina useita kiinteitä kasvaimia, mikä johtaa kehittymistä ja etenemistä syövän [27]. CD44 voitaisiin käyttää uutena merkkiaineena ominaisuudet ja hallinta monia kasvaimia, kuten GC [28], tai CRC [11]. Viime aikoina monet tutkimukset ovat osoittaneet merkittävän korrelaation tason

CD44

ilmaisun ja rintasyöpä tuumorigeenisyyteen, mikä korostaa tärkeää roolia

CD44

kasvaimen etenemisen ja etäpesäkkeiden [11, 29, 30 ]. Tutkimuksessamme olemme osoittaneet, että miR211-3p sitoutuu 3’UTR alueen CD44, kohdistaminen CD44 ja hajoamista. Kautta miR211-3p houkutuslintuna,

lincRNA-uc002kmd

.

1

lisää CD44 ilme.

Yhdessä meidän havainnot osoittavat, että

lincRNA-uc002kmd

.

1

voi parantaa CD44 ilmaisun kilpailemalla miR-211-3p, sittemmin välittäjinä solujen vaeltamiseen ja leviämisen CRC.

Kiitokset

Project tukivat avustuksen Natural Science Foundation Zhejiangin maakunnassa Kiinassa (LY16H160048). Myös tätä työtä tukivat avustusta Wenzhou Public Welfare Science and Technology Project (Y20140707), myös tukivat avustuksen inkubaatio projekti Ensimmäinen Affiliated sairaala Wenzhoun Medical University (FHY2014009).